Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:37 мин. • July 8th, 2025
Возьмите ганглий дорсального корешка или DRG, скопление сенсорных нейронов, в холодной, содержащей сыворотку среду, чтобы защитить нейроны во время последующей обработки.
Центрифугуем, затем удалите надосадочную жидкость.
Добавьте фосфатный буфер, содержащий пищеварительные ферменты, и инкубируйте с легким перемешиванием.
Ферменты диссоциируют внеклеточный матрикс, или ECM, и ткань DRG, разрыхляя клетки.
Добавьте сыворотку, содержащую среду, чтобы инактивировать ферменты.
Центрифугуйте, затем выбросьте надосадочную жидкость.
Ресуспендировать DRG и механически диссоциировать ткань с помощью пипеток все меньших размеров для получения клеточной суспензии.
Нанесите слой клеток на градиент плотности бычьего сывороточного альбумина.
центрифуга. Нейроны оседают на дно, образуя гранулу.
Выбросьте слои, содержащие остатки ткани.
Ресуспендируйте нейроны в культуральной среде.
Добавьте нейроны в чашку для культуры с покрытием ECM и инкубируйте.
Удалите среду и добавьте естественные киллеры или NK-клетки.
Добавьте среду для совместного культивирования и изучайте взаимодействие между этими клетками.
Соберите DRG в 15-миллилитровую коническую трубку, наполненную 10 миллилитрами ледяного холода,
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео