Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:52 мин. • July 8th, 2025
Начните с лунки, содержащей нейронные клетки-предшественники или агрегаты NPC в дифференцирующих средах-1 или DM-1.
Эти NPC являются предшественниками нейронной линии, полученной из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека или ИПСК с использованием DM-1 в контролируемых условиях.
Перенесите агрегаты NPC на мембранную вставку, помещенную в лунку, содержащую DM-1, и удалите излишки среды.
Смените среду на ДМ-2 и инкубируйте.
DM-2 содержит питательные вещества и факторы дифференцировки, которые способствуют созреванию NPC в различные типы нервных клеток.
Недифференцированные NPC превращаются в эмбриоидные тела, известные как эмбриоидные тела без сыворотки или SFEBs, поскольку в среде отсутствует сыворотка. Эти БЭ напоминают морфологию развивающегося мозга.
Переложите вкладыш в лунку, содержащую ДМ-3.
DM-3 содержит факторы роста, необходимые для поддержания и роста SFEB.
Инкубируйте до тех пор, пока SFEB не достигнут желаемого размера.
После двух недель культивирования клеток приготовьте шестилуночные планшеты с 40-микронными вставками для клеточных культур и 1 миллилитром среды DM1. Инкубируйте эти планшеты не менее четырех часов перед добавлением культивируемых клеток.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео