Создание 3D-модели совместного культивирования фибробластов и нейронов роговицы человека

Возьмем, к примеру, фибробласты роговицы человека.

Переложите их на мембранную вставку в многолуночную пластину, содержащую среду.

Добавьте носитель в мембранную вставку. Инкубируйте для прилегания фибробластов к вкладышу.

Далее замените среду на среду, содержащую витамин С в мембранной вставке и резервуаре.

инкубировать. Витамин С стимулирует фибробласты к секреции и сборке трехмерного внеклеточного матрикса.

Добавьте суспензию клеток нейробластомы человека поверх фибробластов.

Инкубировать, обеспечивая адгезию клеток нейробластомы.

Теперь добавьте на клетки среду, содержащую ретиноевую кислоту, и дополните резервуар свежей средой.

инкубировать. Ретиноевая кислота запускает дифференцировку клеток нейробластомы в нейральные клетки-предшественники.

Далее извлеките носитель. Внесите в водоем свежие среды. Добавьте в мембранный вкладыш среду, содержащую нейротрофический фактор, и инкубируйте.

Нейротрофические факторы запускают дифференцировку клеток-предшественников в нейроны, создавая 3D-модель совместной культуры фибробластов и нейронов роговицы человека.

Чтобы собрать 3D-конструкции, сначала пройдите и подсчитайте фибробласты роговицы человека. Затем высадите примерно 1 ум на 10-6