Создание конфигурации всей клетки с помощью метода патч-зажима

Начните с иммобилизованного среза мозга мыши, помещенного в регистрирующую камеру электрофизиологической установки, заполненную искусственной спинномозговой жидкостью для поддержания жизнеспособности нейронов.

Установка содержит предварительно собранную записывающую микропипетку, наполненную катионным раствором, подключенную к усилителю и блоку контроля давления.

Под микроскопом найдите нейрон и расположите микропипетку рядом с ним.

Приложите положительное давление воздуха, чтобы очистить от мусора.

Перемещайте микропипетку по направлению к нейрону до тех пор, пока на мембране не образуется ямочка, указывающая на близость нейронов.

Примените слабое всасывание, чтобы втянуть небольшой мембранный пластырь внутрь микропипетки.

Это создает плотное уплотнение, которое увеличивает сопротивление микропипетки, подтверждая стабильное уплотнение.

Поддерживайте потенциал клетки на физиологическом уровне покоя для стабильности клетки.

Затем примените кратковременное, сильное отсасывание, чтобы нарушить мембрану патча, установив прямую связь с внутренней частью клетки.

Эта конфигурация цельной клетки готова к регистрации электрической активности нейронов.

С помощью колеса точной фокусировки мик