Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:21 мин. • July 8th, 2025
Начните с того, что положите смоченную солевым раствором губку на грудной позвонок крысы, подготовленной к процедуре.
Поместите на него электрод для трансспинальной стимуляции постоянным током или tsDCS, которая включает в себя подачу постоянного тока через спинной мозг.
Для измерения внутриклеточной регистрации целевого мотонейронов во время tsDCS вводят микроэлектрод в спинной мозг в месте его начала.
Оцените базовый мембранный потенциал мотонейрона и частоту электрических импульсов, чтобы убедиться в надежном размещении микроэлектрода для точных измерений во время tsDCS.
Применяйте анодные tsDCS, при которых положительно заряженные ионы попадают в нейрон по мере того, как ток течет от анода через ткань к катоду.
Применяют катодальную tsDCS, при которой отрицательно заряженные ионы попадают в нейрон по мере того, как ток течет в обратном направлении.
Запишите изменения электрических свойств мотонейрона во время анодного и катодного tsDCS.
Чтобы разместить трансспинальные электроды для стимуляции постоянным током, поместите пропитанную солевым раствором губку на дорсальную сторону позвонка TH-12 и с помощью тонких манипуляций надавите на губку активным трансспинальным электродом для стимуляции постоянным током. Затем установите на микроманипулятор специально натянутый микроэлектрод, обеспечивающий ступенчатое движение от 1 до 2 микрон и стереотаксическую калибровку, и введите наконечник микропипетки в выбранный участок в PR под медиально-латеральным углом от 15 до 20 градусов.
Чтобы зарегистрировать мембрану моторного нейрона и его активы, в режиме мостика внутриклеточного амплификатора, стимулировать соответствующие нервные ветви для идентификации мотонейрона на основе проявления потенциала антидромного действия по принципу «все или ничего».
В режиме зажима прерывистого тока внутриклеточного усилителя с частотой переключения тока от 4 до 8 килогерц используйте 0,5-миллисекундные импульсы внутриклеточного деполяризующего тока для вызова потенциала ортодромического действия в моторном нейроне.
Чтобы рассчитать входное сопротивление клетки, стимулируйте двигательный нейрон 40 короткими 100-миллисекундными импульсами гиперполяризующего тока в 1 наноампер. Чтобы определить величину реооснования как минимальную амплитуду деполяризующего тока, необходимую для возникновения одного спайка, стимулируйте моторный нейрон 50-миллисекундными прямоугольными волновыми импульсами с возрастающей амплитудой.
Затем впрыскиваем 500-миллисекундные прямоугольные волновые импульсы деполяризующего тока с возрастающей амплитудой с шагом 0,122 наноампера, чтобы вызвать ритмичные разряды моторных нейронов. Для трансспинальной стимуляции постоянным током начинайте поляризационные процедуры с трансспинального применения постоянного тока, сохраняя при этом стабильное проникновение в двигательный нейрон.