Использование многоэлектродных матриц для измерения синаптической физиологии в сферах 3D-кокультуры

Возьмем, к примеру, стерильную многоэлектродную матрицу или МЭА, устройство, которое записывает электрическую активность клеток-мишеней.

Добавьте в МЭА полимерный раствор и инкубируйте.

Полимер покрывает поверхность MEA, тем самым увеличивая притягивающие воду свойства поверхности.

Удалите излишки полимера и промойте деионизированной водой.

Добавьте внеклеточный матрикс, или ЭКМ, и инкубируйте, чтобы он мог покрыть MEA. Удалите лишний ЭХМ.

Затем добавьте сферы 3D-кокультуры, состоящие из нейронов и астроцитов, в подходящую среду.

Инкубируйте, чтобы шарики прилипли к поверхности MEA.

Поместите MEA на ступень с регулируемой температурой системы MEA и зарегистрируйте спонтанную электрическую активность на электродах.

Измеренная электрическая активность соответствует связи в нейронных соединениях внутри сферы.

Начните с покрытия поверхности каждой многоэлектродной матрицы или МЭА 1 миллиметром полиорнитина, чтобы сделать поверхность гидрофильной, и инкубируйте при температуре 37 градусов Цельсия в течение как минимум четырех часов. После инкубации удалите полиорнитин и промойте поверхность каждого MEA деионизированной водой. Затем добавьте 1 миллилитр внеклеточного матрикса и верните в инкубатор минимум на четыре часа.

Когда все будет готово, удалите внеклеточный матрикс, затем нанесите сферы в 1,5 миллилитрах среды на поверхность MEA, убедившись, что сферы расположены поверх электродной матрицы. Дать прилипнуть в течение двух суток. Чтобы измерить электрическую активность нейронных сфер, поместите MEA на головной стол с регулируемой температурой.