Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:10 мин. • July 8th, 2025
Начните с камеры регистрации поведения, содержащей обезболенную трансгенную личинку данио-рерио, обездвиженную в легкоплавкую агарозу.
Область претектума среднего мозга личинки и нижняя доля гипоталамуса содержат модифицированные нейроны, экспрессирующие флуоресцентные показатели кальция.
Удалите агарозу вокруг головы личинки и промойте водой, чтобы удалить остатки агарозы.
Поместите парамеций в качестве добычи рядом с личинкой.
Перенесите записывающую камеру под флуоресцентный микроскоп.
Когда добыча плавает, глаз личинки обнаруживает ее и посылает сигнал в области претектума и гипоталамуса, участвующие в обнаружении добычи.
Это открывает кальциевые каналы в этих нейронах, позволяя ионам кальция проникать и связываться с показателями кальция, что приводит к излучению флуоресценции.
Запишите покадровую съемку, чтобы определить интенсивность флуоресценции нейронов вдоль траектории плавания добычи и создать цветовую карту.
На этой карте наконечники стрелок представляют траектории добычи: черные стрелки не показывают возбуждения нейронов, в то время как цветные стрелки указывают на повышенное возбуждение нейронов, вызванное движением добычи.
После культивирования парамеции и обезболив
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео