Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:01 мин. • July 8th, 2025
Возьмем трансгенные черви Caenorhabditis elegans, растущие на агаровом блоке.
Эти черви экспрессируют индикатор кальция, GCaMP5, и нечувствительный к кальцию флуоресцентный белок mCherry, в нейронах, которые регулируют поведение при откладывании яиц.
Установите червей на инвертированный предметный столик микроскопа.
Визуализируйте GCaMP5 и флуоресценцию mCherry.
Перед высвобождением яйцеклеток нейроны активируются, открывая потенциал-зависимые кальциевые каналы, которые обеспечивают приток кальция.
Внутриклеточный кальций связывается с GCaMP5, изменяя его конформацию и увеличивая флуоресценцию.
Между тем, флуоресценция mCherry остается неизменной, что позволяет отслеживать нейрон.
Активированные нейроны высвобождают нейротрансмиттеры, которые связываются с определенными мышечными рецепторами, вызывая высвобождение яйцеклеток.
После высвобождения кальциевые каналы закрываются, уменьшая приток кальция и флуоресценцию GCaMP5.
Затем сделайте снимки светлого поля, чтобы наблюдать за движением червя.
Снижение подвижности происходит из-за сокращений мышц до выхода яйцеклетки.
После выпуска яйцеклеток мышцы расслабляются, восстанавливая нормальную подвижность.
Измерьте коэффициент флуоресц
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео