Имплантация электродов в кору головного мозга мыши для электрокортикографических записей

Возьмем, к примеру, мышь под наркозом с обнаженным черепом на стереотаксической рамке. Этой мыши был введен вирус, экспрессирующий мутировавший белок, разрывающий актин, в правую кору головного мозга.

Вкрутите электрод электрод в место инъекции.

Отметьте и просверлите череп перпендикулярно для заднего электрода, электрода сравнения и ремонтных винтов.

Продезинфицируйте участки антисептиком и заблокируйте их, чтобы предотвратить кровотечение.

Вставьте винты и электроды под одинаковыми углами сверла и нанесите стоматологический цемент в пространство между ними.

Теперь используйте свет, чтобы затвердеть цемент.

Покройте основания электродов и винтов стоматологическим цементом и снова нанесите свет. Закрепите сборку акриловым цементом. Зашить кожу.

Подсоедините золотые провода электродов к контактам разъема.

Закройте место коннектора акриловым цементом.

Дайте мыши восстановиться. После выздоровления запишите сигналы коры головного мозга в ответ на инъекцию вируса.

Для имплантации электродов используйте прямые щипцы Келли, чтобы медленно вкрутить один электрод с помощью прямой золотой проволоки в вертикальную ось отверстия, в которое был введен AAV, оставляя не менее 2,5 миллиметров винта за пределами черепа, чтобы свести к минимуму повреждение твердой мозговой оболочки и коры головного мозга.

С помощью ручки отметьте положение электрода сравнения на 2,6 миллиметра вправо от средней линии и на 0,7 миллиметра позади брегмы, а также положение заднего электрода электрокортикографического на расстоянии 1,5 миллиметра вправо от средней линии и на 1,5 миллиметра впереди лямбды, а также положение трех поддерживающих винтов на левом полушарии без конкретных координат, но максимально удаленные друг от друга и от электрокортикографических электродов.

С помощью дрели осторожно проткните череп перпендикулярно поверхности черепа в отмеченных местах других электродов и винтов, а проколотый череп промойте 10% раствором повидон-йода.

Перед установкой винтов заблокируйте отверстия небольшими свернутыми кусочками деликатной рабочей протирки, чтобы предотвратить кровотечение и загрязнение, и используйте прямые щипцы Келли, чтобы вставить винты в отверстия под тем же углом, под которым отверстия были пробиты. Поместите несколько небольших капель стоматологического цемента в центр кольцеобразного пространства внутри винтов. После закрытия глаз животного нанесите свет на три-пять минут, чтобы цемент затвердел, и используйте дополнительный стоматологический цемент, чтобы покрыть основание электродов, и анкерные винты, чтобы сформировать корончатый контур.

После нанесения еще трех-пяти минут света заполните центр монтажа акриловым цементом, и снимите хирургические зажимы.

Используйте синтетический рассасывающийся монофиламентный шов, чтобы закрыть кожу спереди и сзади монтажа, чтобы череп не обнажался, и используйте изогнутые щипцы, чтобы удерживать разъем над монтажом, чтобы тщательно выровнять золотые провода электродов с контактами разъема. Затем быстро припаяйте каждый конец электрода к одному соответствующему контакту разъема.

Сняв мышь с рамы, накройте пустое пространство между разъемом и головкой акриловым цементом, а после взвешивания поместите мышь в чистую клетку с крышкой без сетки на грелку.