Индукция варикозного расширения вен аксонов с помощью микромеханического стимула на нейронах

Начните с закрепления микропипетки с присоединенной трубкой к микроманипулятору.

Присоедините другой конец трубки к шприцу, наполненному солевым буфером, через соединитель с поворотным клапаном.

Установите шприц на высоту, обеспечивающую достаточное давление для индуцирования варикозного расширения аксонов.

Аксональное варикозное расширение вен — это бусинчатые припухлости, которые возникают по всей длине аксона.

Расположите микропипетку под нужным углом относительно чашки для культивирования.

С помощью флуоресцентного света микроскопа выровняйте кончик микропипетки и опустите его ближе к поверхности чашки для клеточных культур, содержащей солевой буфер.

Теперь включите проходящий свет и выключите флуоресцентный фильтр.

Положите на блюдо покровную салфетку с нейронами.

Сначала сосредоточьтесь на микропипетке и отрегулируйте ее положение.

Затем сосредоточьтесь на области, содержащей целевые нейроны.

Откройте клапан, чтобы подать давление жидкости. Этот микромеханический стимул вызывает варикозное расширение вен в этих нейронах.

При этой процедуре пипетку вставляют в завинчивающуюся верхнюю часть микроманипулятора, чтобы удерживать ее на месте. Наклоните пипетку под углом 45 градусов