Неинвазивный подход к изучению электрофизиологии двигательных нейронов у эмбрионов рыбок данио
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 5:10 мин. • July 8th, 2025
Поместите генетически модифицированные эмбрионы рыбок данио под стереомикроскоп и понаблюдайте за спонтанным скручиванием хвоста, вызванным двигательными нейронами спинного мозга.
Внутренние свойства этих нейронов вызывают приток ионов через натриевые каналы, что приводит к спонтанной деполяризации мембраны и генерации потенциалов действия, которые распространяются на мышцы, вызывая скручивание хвоста. Измерьте частоту намотки.
Перенесите некоторые эмбрионы в блокатор натриевых каналов, чтобы подавить приток натрия и оценить сниженную частоту скручивания.
Поместите необработанные эмбрионы в расплавленную агарозу; дайте агарозе застыть, чтобы ограничить движение, и наблюдайте под флуоресцентным микроскопом.
Моторные нейроны экспрессируют биосенсор с мембранным потенциал-чувствительным доменом, или VSD, слитым с донорными и акцепторными флуорофорами.
Деполяризация изменяет конформацию ДМЖ, сближая флуорофоры.
При возбуждении донор передает энергию акцептору, вызывая излучение акцепторной флуоресценции.
Добавьте блокатор для ингибирования деполяризации, которая снижает эмиссию акцептора, подтверждая блокатор-опосредованное ингибирование спонтанной деполяризации в нейронах.
Для анализа
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео