Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:26 мин. • July 8th, 2025
Закрепите мышь под наркозом в положении лежа на спине.
Подкожно вводят стимулирующие электроды, выравнивая их с нервом, иннервирующим мышцу передней конечности.
Подкожно вставьте записывающий электрод поверх мышцы плеча, электрод сравнения — в прогулочные подушечки, а заземляющий электрод — сбоку.
Применяйте электрические импульсы для стимуляции нейронов передних конечностей, вызывая положительный приток ионов и генерацию потенциала действия.
Потенциал действия индуцирует высвобождение возбуждающих нейротрансмиттеров в нервно-мышечном соединении, что приводит к активации и сокращению мышечных волокон.
Запишите комбинированную реакцию всех мышечных волокон — совокупный потенциал действия мышц, или CMAP.
Применяйте максимальные раздражители, чтобы обеспечить стимуляцию всех мышечных волокон.
Завершите стимуляцию и определите латентность, временную задержку между инициацией стимула и ответом.
Повышенная латентность указывает на снижение скорости проводимости из-за демиелинизации нейронов.
Измерьте амплитуду CMAP; уменьшенная величина указывает на потерю функциональных нейронов.
Чтобы измерить CMAP на передних конечностях, расположите мышь на грелке в положении лежа на спине и с помощью клейкой ленты удлините обе передние конечности по бокам тела. Затем подкожно поместите 5 миллиметров стимулирующего электрода, не прокалывая нижележащие мышцы с обеих сторон передней конечности, чтобы выровнять их с нервом плечевого сплетения.
Затем поместите записывающий электрод подкожно над двуглавой мышцей плеча. Затем поместите 3 миллиметра электрода сравнения под углом 30 градусов на прогулочные коврики и вставьте заземляющий электрод подкожно сбоку мыши.
В этой конфигурации электроды находятся в непосредственной близости друг от друга. Не допускайте соприкосновения электродов друг с другом, так как это искажает запись.
Стимулируйте все аксоны с помощью одного импульса в секунду с длительностью стимула 0,1 миллисекунды. Чтобы получить данные, начните стимуляцию, нажав кнопку рекуррентного стимула в блоке контроллера, и поверните ручку регулятора интенсивности, чтобы увеличить стимул.
Чтобы достичь сверхмаксимальных стимулов, применяйте увеличивающие стимулы, поворачивая ручку регулятора интенсивности до тех пор, пока амплитуда ответа CMAP не перестанет увеличиваться. Далее увеличьте стимул на 20%, чтобы амплитуда CMAP достигла своего максимального отклика. Завершите стимуляцию, снова нажав кнопку повторного стимула.
С помощью инструмента «Маркер» укажите следующие точки в записи: начало отклика, максимальный положительный пик и максимальный отрицательный пик. Инициирование стимула определяется программным обеспечением автоматически.
Определите задержку как задержку от начала стимула до начала ответа. Используйте задержку для оценки демиелинизации в аксонах. Измерьте амплитуду от максимального отрицательного до максимального положительного пика и используйте величину амплитуды для корреляции числа функциональных аксонов.