Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:27 мин. • July 8th, 2025
Начните со свободно движущейся мыши с имплантированной оптоволоконной канюлей.
Подключите один конец оптоволоконного патч-корда к канюле, а другой конец к возбуждающему источнику света.
Мышь экспрессирует генетически кодируемый индикатор кальция с зеленой флуорофорной меткой, или GECI, в латеральной области гипоталамуса, или нейронах LHA.
Имплантированное оптическое волокно контактирует с латеральной областью поводка, или LHb, где заканчиваются аксоны LHA.
Возбуждайте GECI на оптимальной длине волны возбуждения и записывайте базовый сигнал.
Теперь нанесите на мышь повторные затяжки воздуха, чтобы вызвать отвратительную реакцию на стресс.
Этот стимул запускает потенциалы действия в клеммах аксонов LHA, открывая потенциал-зависимые кальциевые каналы и обеспечивая приток кальция.
Внутриклеточные ионы кальция связываются с GECI, вызывая конформационные изменения, которые увеличивают излучение зеленой флуоресценции.
Визуализируйте оптический сигнал.
Повышенная флуоресценция в ответ на затяжки воздуха у мыши подтверждает роль пути LHA-LHb в передаче аверсивных сигналов.
Начните с осмотра дистального конца волокон патч-корда на глаз и с помощью мини-волоконного микроскопа. Если поверхност
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео