Фотостимуляция и запись с помощью целоклеточного зажима нейронов в срезах гиппокампа мыши

Возьмите иммобилизованный трансфицированный срез мозга мыши в камере электрофизиологической записи, перфузированной кислородосодержащим аКСФ.

Этот срез содержит окончания аксонов нейронов таламуса, экспрессирующие светочувствительные ионные каналы, слитые с флуоресцентным белком.

Визуализируйте аксоны флуоресцентных таламических нейронов и выберите пирамидальный нейрон.

Продвигайте записывающую пипетку, содержащую электрод во внутриклеточном растворе, по направлению к выбранному нейрону с небольшим положительным давлением.

Положительное давление создает ямочку на мембране нейронов при контакте.

Сбросьте давление, чтобы сформировать высокопрочное уплотнение.

Установите потенциал мембраны на постоянное отрицательное значение.

Подайте импульс отрицательного давления, чтобы разорвать мембрану, достигнув цельной клеточной конфигурации.

Освещайте окончания аксонов, активируя светочувствительные каналы и деполяризуя нейронные мембраны, запуская потенциалы действия.

Высвобождаются возбуждающие нейротрансмиттеры, связывающиеся с рецепторами на записанном нейроне, вызывая приток катионов.

Запишите возникающие возбуждающие постсинаптические токи, указывающие на прямую синаптическую связь межд