Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:08 мин. • July 8th, 2025
Начните с перфузии аэрированной искусственной спинномозговой жидкости или аКСФ над сеткой в перфузионной камере.
Перенесите срез мозга, содержащий нейроны, экспрессирующие флуоресцентные белки, и закрепите его с помощью платинового устройства.
Поверните сетку сетки для выравнивания.
Опустите многоканальный щуп по направлению к срезу.
Отрегулируйте кубик фильтра для визуализации флуоресцентного белка.
Поверните срез, чтобы выровнять щуп.
Отрегулируйте высоту зонда ниже поверхности ткани.
Теперь выполните перфузию aCSF и сосредоточьтесь на флуоресцентно помеченных нейронах.
Используя объектив высокой мощности, сфокусируйтесь на ткани и отрегулируйте возбуждающий свет.
Используйте соответствующий световой фильтр для наблюдения за флуоресценцией в нейронах.
Отрегулируйте линзу объектива, чтобы освободить место для патч-пипетки, и надавите на нее.
Затем расположите пипетку рядом с нейроном, чтобы образовалась мембранная ямочка.
Наконец, примените слабое всасывание для создания уплотнения мембраны, а затем сильное всасывание для разрыва мембраны и получения электрических записей от целевого нейрона.
Чтобы поместить многоканальный зонд в предметное стекло ткани мозга ex vivo, перфузируйте
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео