Регистрация локального полевого потенциала из обоих полушарий мозга мыши

Начните с мыши, находящейся под наркозом, голова которой закреплена в стереотаксической рамке.

Побрейте и простерилизуйте кожу головы.

Сделайте разрез и удалите остатки ткани, чтобы обнажить череп.

Очистите череп дезинфицирующим средством и просверлите отверстия в целевых местах.

Удалите внешний слой мозга.

Вставьте в отверстия микроэлектроды, наполненные ионным раствором, под нужным углом.

Опустите оба микроэлектрода в целевые координаты мозга.

Проверьте сопротивление электродов и отрегулируйте настройки записи, чтобы обеспечить надежный сбор данных о потенциале локального поля или LFP.

LFP отражает изменения напряжения, возникающие в результате коллективной активности многих нейронов в небольшой области.

Запишите LFP из обоих полушарий, чтобы сравнить нейронную активность между ними.

Перед операцией подтвердите глубину анестезии мыши, выполнив щипцы хвоста или пальца ног щипцами. Далее расположите мышь в стереотаксическом аппарате, и зафиксируйте ее голову. Нанесите мазь на оба глаза, чтобы они оставались влажными.

Затем побрейте голову и простерилизуйте область. Сделайте небольшой надрез от 12 до 15 миллиметров посередине выбритого участка. С помощью щипцов аккуратно оттяните кожу головы от средней линии. После этого аккуратно отделите кожу и удалите остатки ткани.

Очистите череп с помощью ватных палочек, покрытых перекисью водорода. Под стереомикроскопом просверлите два небольших отверстия радиусом от 1 до 1,5 мм на левой и правой сторонах черепа, чтобы можно было ввести записывающие микроэлектроды в области M2.

Осторожно удалите твердую мозговую оболочку вольфрамовой иглой, затем с помощью механических микроманипуляторов вставьте в отверстия под углом 60 градусов два отдельных записывающих микроэлектрода, заполненных 0,5 моляра хлорида натрия.

Для записи в формате LFP медленно опустите левый и правый стеклянные электроды в координаты M2. Для контроля качества проверьте сопротивление каждого электрода с помощью дифференциального усилителя. Затем установите процесс записи на частоту 0,1 Гц верхних частот и 1 000 Герц низких частот с 1 000-кратным усилением. Соберите оцифрованные необработанные данные LFP в стабильном состоянии в течение не менее 60 секунд, при этом мышь дышит равномерно со скоростью два вдоха в секунду под анестезией.