Анализ поведения мышей во сне с помощью электроэнцефалограммы и записи электромиограммы

Закрепите мышь под наркозом на стереотаксической раме.

Продезинфицируйте выбритую кожу, накройте мышь простыней и сделайте разрез по средней линии, чтобы обнажить череп.

Просверлите два отверстия в черепе по определенным стереотаксическим координатам.

Подготовьте блок записывающих электродов с четырехконтактным разъемом, подключенным к проводам из нержавеющей стали.

Используйте два провода с винтами в качестве электроэнцефалограммы, или электроды ЭЭГ для измерения электрической активности мозга.

Используйте два других провода в качестве электромиограммы или электродов ЭМГ для измерения электрической активности мышц.

Вкрутите электроды ЭЭГ в отверстия, и закрепите электродный узел на черепе.

Вставьте электроды ЭМГ в мышцы шеи.

Закройте разрез швами и дайте мышке восстановиться.

Перенесите мышь в звуконепроницаемую камеру записи.

Подключите электродный узел к записывающему кабелю и подключите его к усилителю.

Записывайте сигналы ЭЭГ и ЭМГ, чтобы анализировать различные стадии сна и бодрствования у мышей.

Перед началом работы простерилизуйте все хирургические инструменты в стерилизаторе с горячими шариками. Как только подтвердится, что мышь находится под наркозом в результате щипкового пальца ноги, сбрейте волосы на голове и шее.

Далее закрепите мышь на стереотаксической рамке, а голову закрепите между двумя ушными планками. Затем нанесите офтальмологическую мазь на глаза, чтобы предотвратить сухость. Приступайте к очищению выбритой кожи спиртовыми и йодсодержащими скрабами.

Затем разрежьте по средней линии скальпелем, чтобы обнажить череп, и закрепите кожу сбоку с помощью зажимов, чтобы операционная область оставалась открытой. С помощью твердосплавной фрезы со сверлом 0,8 миллиметра сделайте два отверстия. Поместите одно отверстие над лобной кортикальной областью. Второе отверстие наденьте над теменной областью правого полушария.

Далее с помощью ювелирной отвертки вкрутите в отверстия записывающие винты ЭЭГ из нержавеющей стали. Вставьте винты всего за два-два с половиной оборота, чтобы получить эпидуральное позиционирование над корой головного мозга. Винты не должны покачиваться после вставки. Это очень важно.

Теперь закрепите электрод в сборе штифтами вверх к черепу. Электроды должны быть прикреплены прямо. Используйте ватный тампон, чтобы зафиксировать положение электродов, и приклейте электрод с помощью цианоакрилата, а затем стоматологического цемента.

Затем сделайте небольшие отверстия в трапеции и вставьте в них электрод ЭМГ. Затем зашите кожу шелковой нитью диаметром 0,1 миллиметра. Теперь извлеките мышь из стереотаксической рамки, и поместите ее на грелку.

Делайте мышам внутрибрюшинные инъекции ампициллина и мелоксикама и наблюдайте за мышью до тех пор, пока она не восстановит лежачее положение на грудине. Затем поместите мышь в один дом.

Через неделю после вживления электродов перенесите мышь в экспериментальную клетку в звуконепроницаемую камеру звукозаписи. Закрепите электрод в сборе ЭЭГ/ЭМГ на мыши на записывающем кабеле, подключенном к контактному кольцу.

Подключите кабель АЦП к усилителю фильтра сигналов ЭЭГ/ЭМГ, подключенному к контактному кольцу. Используйте АЦП для преобразования сигнала в цифровой сигнал с частотой 128 Гц и, наконец, запишите сигнал на компьютер.

Приучите мышь на два-три дня к камере записи. Запустите программное обеспечение для записи ЭЭГ/ЭМГ. Для начала перейдите на вкладку с информацией о файле данных и установите флажок рядом с именем файла. Введите имя файла и нажмите кнопку Сохранить. Затем на вкладке «Условия записи» выберите все каналы ЭЭГ/ЭМГ, которые необходимо записать. Также выберите частоту дискретизации на этой вкладке.

Теперь во вкладке информации о канале проверьте, правильно ли отображаются выбранные каналы. После подтверждения запустите запись, сначала выбрав вкладку настроек таймера. Затем нажмите «Монитор», чтобы отобразить ЭЭГ и ЭМГ. Если сигналы отображаются корректно, установите часовое время начала и окончания записи в области основного таймера. Затем нажмите кнопку монитора, чтобы начать запись.