Внеклеточная регистрация электрической активности в центральной нервной системе дрозофилы

Поместите пересеченную центральную нервную систему (ЦНС) личинки дрозофилы в записывающую камеру, заполненную физиологическим раствором.

Транссектированная ЦНС включает вентральные ганглии и нисходящие периферические нервы.

Поместите аспирационный электрод на задний конец транссектированной ЦНС. Подключите камеру к заземляющему проводу, чтобы уменьшить фоновый шум.

Приложите отрицательное давление, чтобы втянуть периферический нерв в электрод и начать внеклеточную запись активности нерва.

Отслеживайте спонтанную генерацию нейронами потенциалов действия с течением времени, называемую базовой частотой возбуждения, и позвольте ей стабилизироваться.

Добавьте растворитель в качестве контроля. Запишите действие, чтобы частота срабатывания оставалась соответствующей базовому уровню.

Введите растворенный в растворителе испытуемый агент и зарегистрируйте частоту срабатывания.

Увеличение частоты проявляет возбуждающее действие агента, в то время как уменьшение частоты указывает на ингибирующий эффект.

Для начала сначала вытяните стеклянный электрод пипетки из капилляров боросиликатного стекла с сопротивлением от 5 до 15 мегаом. Вставьте рассеченную ЦНС в восковую камеру, содержащую 200 микро