Тестирование моносинаптических соединений с использованием тетродотоксина и резистентных к тетродотоксину натриевых каналов

Начнем с электрофизиологической установки, содержащей обездвиженную трансгенную муху с открытым мозгом.

Расположите записывающую микропипетку рядом с постсинаптическим нейроном, соединенным с пресинаптическим нейроном, совместно экспрессирующим ретродотоксино-резистентные натриевые каналы и красные светочувствительные каналы, а также интернейрон с тетродотоксино-чувствительными натриевыми каналами.

Нанесите мягкое отсасывание на микропипетку, чтобы сформировать плотное уплотнение с мембраной нейрона.

Затем примените сильное всасывание, чтобы нарушить мембрану.

Поддерживайте постоянный потенциал клеток. Введите тетродотоксин, который блокирует натриевые каналы в интернейроне, препятствуя передаче сигнала от интернейрона к постсинаптическому нейрону.

Тем не менее, устойчивые к тетродотоксину натриевые каналы остаются незатронутыми, что позволяет ионам натрия проникать в пресинаптический нейрон

.

Осветите муху с помощью импульсов красного света.

Это стимулирует светочувствительные каналы, позволяя катионам притокаться и активировать пресинаптический нейрон.

Этот пресинаптический нейрон напрямую передает сигнал постсинаптическому нейрону, не вовлекая интернейрон, и возникающая электриче