Одновременная электроэнцефалографическая регистрация и регистрация потенциала локального поля у крысы под наркозом

Прикрепите крысу под наркозом к стереотаксической раме с обнаженным черепом.

У крысы есть отверстие в черепе с проколотой твердой мозговой оболочки, разрез на шее и стимулирующие электроды, прикрепленные к подушечкам усов.

Зафиксируйте электроэнцефалограмму, или ЭЭГ, паукообразный электрод, смазанный проводящей пастой на черепе, сохраняя отверстие от заусенца чистым.

Паук-электрод измеряет поверхностную ЭЭГ, отражая общую активность нейронов из корковой области под ним.

Установите линейный многоканальный микроэлектрод на микроманипулятор.

Введите микроэлектрод в кору головного мозга через отверстие для заусенцев на глубину до 1500 микрометров.

Микроэлектрод измеряет потенциал локального поля, или LFP, отражающий активность нейронов коры головного мозга.

Поместите электроды сравнения ЭЭГ и LFP внутрь разреза на шее.

Подключите записывающие и референсные электроды к предусилителю, подключенному к блоку сбора данных.

Нанесите электрические раздражители на подушечки усов и отрегулируйте глубину микроэлектродов, чтобы максимизировать вызванную амплитуду LFP. Записывайте совместно локализованные сигналы ЭЭГ и LFP.

При этой процедуре очистите и высушите череп, окружающий отверстие от заусенца, с помощью ватной палочки. Осторожно нанесите проводящую пасту ЭЭГ на плоскую сторону электрода ЭЭГ-паука. Оставьте небольшое отверстие свободным от пасты ЭЭГ на пауке-электроде, чтобы многослойный микроэлектрод мог пройти через отверстие, не соприкасаясь с пастой и пауком-электродом.

Совместите паутинный электрод с отверстием в черепе с помощью пасты для ЭЭГ, обращенной к черепу. Осторожно прижмите паукообразный электрод к черепу, плотно соприкасаясь с черепом с помощью пасты ЭЭГ.

Удалите любую пасту, скрывающую отверстие от заусенца, с помощью иглы на шприце и удалите излишки пасты ЭЭГ за пределами периферии паутинного электрода, чтобы контакт между паутинным электродом и черепом был пространственно ограничен размером электрода. Затем нанесите пасту ЭЭГ на электрод сравнения для ЭЭГ и надежно поместите его внутрь разреза на задней части шеи крысы.

Далее подключите электроды ЭЭГ к предусилителю через пассивный делитель сигнала для сигналов с низким импедансом. На этом этапе проверьте сопротивление датчика ЭЭГ, чтобы убедиться, что оно ниже пяти килоом. Если нет, добавьте больше пасты для ЭЭГ и убедитесь, что паутинный электрод хорошо соприкасается с черепом.

Впоследствии смонтируйте руку-микроманипулятор на стереотаксическую раму. Подключите линейный 16-канальный микроэлектрод к 16-канальному столику с острой головкой, надежно закрепленному на руке микроманипулятора. Затем нанесите ЭЭГ-пасту на электрод сравнения для микроэлектрода, а затем надежно поместите его внутрь разреза рядом с электродом сравнения для ЭЭГ. Отрегулируйте угол наклона руки микроманипулятора так, чтобы микроэлектрод был перпендикулярен поверхности коры головного мозга.

Теперь опустите микроэлектрод под микроскоп так, чтобы кончик микроэлектрода был направлен на крошечное отверстие на дне отверстия для заусенцев, пока самый верхний электрод не проникнет в поверхность коры головного мозга. Необходимо соблюдать осторожность, чтобы не надавить микроэлектродом на поверхность твердой мозговой оболочки, так как это может привести к поломке электрода.

Введите микроэлектрод в поверхность коры головного мозга на глубину до 1500 микрометров. Микрорегулировка глубины путем приложения последовательности стимулов к подушечке усов и наблюдения за 16-канальной вызванной LFP на мониторе ПК. Осторожно поворачивайте ручку оси Z на микроманипуляторе до тех пор, пока не произойдет наибольшая амплитуда вызываемого LFP, так как она совпадает со слоем 4 в коре головного мозга.