Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:34 мин. • July 8th, 2025
Возьмем корональный срез хемосенсорного вомероназального органа у трансгенной мыши, экспрессирующей флуоресцентно меченые сенсорные нейроны.
Сенсорный эпителий содержит эти меченые нейроны, которые подвергаются воздействию просвета, соединенного с носовой полостью для восприятия химических сигналов.
Закрепите срез в камере визуализации с помощью анкера для среза.
Переведите камеру в записывающую установку и влейте насыщенный кислородом внеклеточный раствор для поддержания жизнеспособности тканей.
Расположите перфузионную пипетку рядом со срезом, чтобы ввести химические стимулы, и записывающую пипетку над сенсорными нейронами.
С помощью флуоресцентного микроскопа определите помеченные нейроны.
Приложите положительное давление, чтобы предотвратить засорение пипетки, и приближайтесь к нейрону до тех пор, пока на мембране не образуется ямочка.
Переключитесь на отрицательное давление, втягивая мембрану в пипетку.
Применяйте всасывание для разрыва мембраны и установления непрерывности с цитоплазмой, называемое цельноклеточным зажимом, что позволяет вводить химические стимулы и записывать полученные электрофизиологические сигналы.
Перенесите срез VNO в камеру визуализации и зафиксируйте п
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео