Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:58 мин. • July 8th, 2025
Закрепите бодрствующую мышь в стереотаксической рамке с серебряным проводом, вставленным в ее твердую мозговую оболочку, и отверстием, открывающим область мозга, которая обрабатывает слуховые стимулы.
Залейте раствор препарата в многоцилиндровую стеклянную пипетку, оснащенную вольфрамовым электродом, и прикрепите ее к держателю стереотаксической рамки.
Вставьте в бочки серебряные провода без покрытия, убедившись, что один конец контактирует с раствором, а другой подключается к устройству, контролирующему высвобождение лекарства.
Подсоедините положительную и заземляющую клеммы записывающих проводов к вольфрамовому электроду и серебряному проводу, контактирующим с твердой мозговой оболочкой, соответственно.
Поместите многоствольный электрод на поверхность мозга и примените слуховые стимулы.
Запишите активность нейронов.
Далее подайте положительный ток для высвобождения препарата.
Препарат проникает в мозг и блокирует специфические рецепторы, предотвращая ингибирующее связывание нейромедиаторов и повышая возбудимость нейронов.
Наконец, снова примените слуховые стимулы и определите усиление нейрональной реакции после медикаментозного лечения.
Во время этой процедуры поместите тело животного в изготовленный на заказ ограничитель с поролоновой подушкой. Закрепите оголовок на держателе, прикрепленном к стереотаксической раме. Это хорошее время, чтобы дать животному жидкое вознаграждение. Далее накройте тело животного хлопчатобумажным одеялом, и неплотно закрепите его с помощью пластикового гемицилиндра и скотча.
С помощью шприца с гибким наконечником наполните бочки выбранными препаратами. С помощью микроманипулятора поместите многоствольный электрод на его держатель. Затем поместите серебряную проволоку без покрытия внутрь каждой бочки так, чтобы один конец соприкасался с раствором, а другой конец был доступен. Затем подключите эти концы к устройству микроионофореза.
После этого подключите положительную клемму к концу вольфрамового электрода, а клемму заземления к серебряному проводу, который контактирует с твердой мозговой оболочкой. Впоследствии перемещайте многоствольный электрод до тех пор, пока наконечник не соприкоснется с поверхностью мозга. Применяйте теплый стерильный физиологический раствор, чтобы предотвратить высыхание тканей мозга. В этот момент подайте ток удержания, чтобы избежать утечки лекарства из наконечника цилиндра при поиске активности одного блока. Запись нейронной активности и ионтофоретического применения габазина.