Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 7:22 мин. • July 8th, 2025
Возьмите сегменты задней мозговой артерии мыши.
Инкубируйте с ферментным раствором, чтобы разрушить тканевый матрикс, разрыхлив клетки.
Замените раствор буфером, затем перенесите сегмент в записывающую камеру.
Механически диссоциировать клеточные слои соединительной ткани и гладкомышечной ткани, изолируя нижележащую эндотелиальную трубку.
Закрепите трубку, удалите диссоциированные слои и добавьте физиологический буфер.
Поместите камеру в записывающую систему с непрерывным буферным потоком.
Введите флуоресцентный индикатор кальция, который поступает в эндотелиальные клетки, затем вставьте в клетку записывающий электрод.
Введите препарат, который вызывает приток ионов кальция и индуцирует нисходящую передачу сигналов для высвобождения кальция из эндоплазматического ретикулума.
Индикатор связывается с кальцием и при возбуждении излучает флуоресценцию.
Увеличение кальция активирует кальций-зависимые калиевые каналы, вызывая отток калия и изменяя мембранный потенциал.
Одновременно регистрируйте изменения внутриклеточного кальция с помощью флуоресцентного сигнала и мембранного потенциала с помощью электрода.
В этой процедуре подготавливают аппарат для растирания с помощью микроскопа, кам
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео