Визуализация никотин-индуцированной передачи сигналов кальция вдоль вентральных аксонов гиппокампа в синаптических культурах
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:11 мин. • July 8th, 2025
Возьмем генетически модифицированные культуры вентральных срезов гиппокампа мыши и нейронов прилежащего ядра на покровном листе.
Нейроны гиппокампа проецируют пресинаптические аксонные окончания, сверхэкспрессируя никотиновые ацетилхолиновые рецепторы, образуя синапсы с прилежащими нейронами постсинаптического ядра.
Нейроны загружаются индикаторным красителем кальция для внутриклеточных измерений кальция.
Перенесите покровное стекло в конфокальную камеру микроскопа, перфузированную буфером, содержащим ионы кальция.
Захватите флуоресцентные изображения аксональных проекций гиппокампа в качестве контроля.
Перфузионный никотин, который связывается с никотиновыми ацетилхолиновыми рецепторами на нейронах гиппокампа, вызывая приток кальция.
Ионы кальция связываются с внутриклеточным красителем, увеличивая флуоресценцию.
Аксоны гиппокампа высвобождают возбуждающие нейротрансмиттеры, инициируя синаптическую передачу в нейронах прилежащего ядра.
Умойтесь с буфером для удаления никотина.
Со временем активация никотиновых ацетилхолиновых рецепторов вызывает высвобождение кальция из внутриклеточных запасов, что приводит к увеличению флуоресценции красителя и указывает на устойчивую передачу ка
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео