Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:55 мин. • July 8th, 2025
Начните с пробирки, содержащей предварительно обработанные магнитные шарики, покрытые антителами, специфичными к белку-мишени, сшитому с ДНК.
Добавьте лизат моторного нейрона, содержащий фрагменты ДНК, и инкубируйте с перемешиванием.
Фрагменты ДНК взаимодействуют с гранулами, покрытыми антителами, образуя комплексы бисер-ДНК.
Центрифуга собирает жидкость из колпачка и помещает ее на магнитный сепаратор для осаждения комплексов бусина-ДНК.
Удалите надосадочную жидкость, содержащую несвязанные фрагменты ДНК.
Введите буфер для лизиса на основе детергента для солюбилизации неспецифически связанных фрагментов ДНК.
Центрифугируйте и выполните магнитную сепарацию, затем удалите надосадочную жидкость.
Мойте с буфером с высоким содержанием соли, чтобы нарушить неспецифические взаимодействия. Центрифугуем, проводим магнитную сепарацию и удаляем надосадочную жидкость.
Промойте буфером LiCl, чтобы удалить оставшиеся неспецифические взаимодействия. Центрифугуем, проводим магнитную сепарацию и удаляем надосадочную жидкость.
Наконец, промойте с помощью буфера Tris-HCl, центрифугируйте и выполните магнитную сепарацию.
Удалите надосадочную жидкость и соберите шарики, содержащие целевые комплексы бе
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео