Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:08 мин. • July 8th, 2025
Возьмем фиксированные органоидные участки мозжечка, состоящие из различных типов нейронов мозжечка.
Промойте секции в буфере, чтобы удалить остатки заделочной среды.
Инкубируйте в глицине для блокирования фиксации остаточных реактивных центров, уменьшая неспецифическое связывание во время иммуноокрашивания.
Добавьте неионогенное моющее средство для проникновения клеток.
Стирайте с буфером, удаляя излишки моющего средства.
Теперь просушите предметное стекло. Переложите его в чашку для иммуноокрашивания с пропитанной буфером бумагой, чтобы предотвратить высыхание тканей.
Нанесите блокирующий раствор, который связывается с неспецифическими участками нейронов.
Удалите блокирующий раствор. Инкубируются с первичными антителами, которые связываются с целевыми антигенами в нейронах мозжечка.
Промойте буфером, удаляя несвязанные антитела.
Инкубируйте с флуорофор-связанными вторичными антителами для связывания первичных антиген-связанных антител.
Затем промойте буфером, удалив несвязанные антитела.
Добавьте краситель для окрашивания клеточных ядер.
С помощью флуоресцентной микроскопии визуализируют маркеры, экспрессируемые в нейронах мозжечка, указывающие на созревание органоидов.
Промойте п
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео