Определение нарушения гематоэнцефалического барьера с помощью флуоресцентных красителей на мышиной модели EAE

Начните с раствора, содержащего зеленый флуоресцентный краситель, связанный с большой цепью декстрана. Затем добавьте раствор красного красителя, связанный с небольшой цепочкой декстрана.

Тщательно перемешайте красители и возьмите в шприц.

Введите эту смесь красителей внутривенно мыши, находящейся под наркозом, через ретроорбитальный синус, вену позади глаза.

Эта мышь страдает экспериментальным аутоиммунным энцефаломиелитом или ЭАЭ.

При этом состоянии гематоэнцефалический барьер нарушается с ослабленными плотными соединениями между эндотелиальными клетками кровеносных сосудов головного мозга с промежутками.

Дайте мыши полностью проснуться и восстановить подвижность, что позволит красителям циркулировать.

Красный краситель с маленькой цепью декстрана легко диффундирует через небольшие щели в ткани мозга, в то время как зеленый краситель, связанный с большой цепью декстрана, диффундирует при серьезном повреждении.

Количество каждого флуоресцентного красителя в ткани мозга коррелирует со степенью разрушения гематоэнцефалического барьера.

Для приготовления стоковых растворов декстрана растворите 10 миллиграммов трехкилодальтонного Dextan Texas Red в 500 микролитрах 0,9% раствора натрия