Иммуноокрашивание черепно-лицевых тканей мышей

0 просмотров2:46 мин • July 8th, 2025

Провести криорезы неподвижных эмбриональных черепно-лицевых тканей мыши, состоящих из клеток нервного гребня.

Промойте срезы в буфере, содержащем неионогенное моющее средство, чтобы удалить встраивающую среду и проникнуть в мембраны, обеспечивая доступ к внутриклеточным мишеням.

Добавьте блокирующий раствор для насыщения неспецифических сайтов связывания.

Удалите излишки блокирующего раствора. Затем инкубируйте с первичными антителами, нацеленными на ядерные антигены, такими как факторы транскрипции и маркеры пролиферации.

Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные антитела.

Инкубируйте с флуорофор-конъюгированными вторичными антителами для связывания с первичными антителами, связанными с антигеном.

Удалите несвязанные антитела с помощью буфера.

Добавьте среду для защиты от выцветания с флуоресцентным ядерным красителем и накройте покровным стеклом.

Краситель окрашивает ядра, а среда, препятствующая выцветанию, защищает флуоресцентные сигналы во время визуализации.

Визуализируйте срезы под флуоресцентным микроскопом, чтобы оценить экспрессию и локализацию ядерных маркеров, указывающих на пролиферацию клеток нервного гребня и сигнальную активность.

Промойте предметные стекла в 0,1% PBST три раза по пять минут каждый, чтобы смыть ОКТ и пропитать срезы. Добавьте 200 микролитров раствора для блокировки на каждое предметное стекло и выдерживайте при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем удалите блокирующий раствор, не промывая предметное стекло. Добавьте 100 микролитров первичного антитела, разведенного в блокирующем растворе, на каждое предметное стекло и инкубируйте в течение ночи при температуре 4 градуса Цельсия.

Промойте предметные стекла PBS три раза по 10 минут каждый при комнатной температуре. Добавьте 100 микролитров вторичного антитела, разведенного в блокирующем растворе, и инкубируйте в течение одного часа при комнатной температуре, защищенном от света. Промойте в PBS три раза по 10 минут каждый при комнатной температуре, но при этом защищенном от света месте. Чтобы установить слайды, добавьте две капли средства защиты от выцветания с DAPI на каждый слайд. Накройте крышкой и храните при температуре 4 градуса Цельсия до готовности к изображению.

06:45

Гистологические окрашивания с использованием свободно плавающих участков тканей

Похожие видео

0 Просмотры

07:58

Свободно плавающее иммуноокрашание мозга мыши

Похожие видео

0 Просмотры

08:46

Фиксация эмбриональной ткани мыши для анализа цитонемы

Похожие видео

0 Просмотры

08:47

Подготовка ткани мозга мыши для иммуноэлектронной микроскопии

Похожие видео

0 Просмотры

02:58

Иммуногистохимическое окрашивание нервных волокон в базальном ядре Мейнера головного мозга мыши

Похожие видео

0 Просмотры

04:46

Иммуноокрашивание флуоресцентно меченых астроцитов в срезе ткани мозга мыши

Похожие видео

0 Просмотры

02:19

Иммуномечение белков нейрональных мембран в сублимационном образце ткани мозга мыши

Похожие видео

0 Просмотры

04:02

Флуоресцентная визуализация нейроиммунной динамики с использованием имплантата черепа

Похожие видео

0 Просмотры

07:30

Грунтовка для иммуногистохимии Cryosectioned ткани мозга крыс: Пример окрашивания для микроглии и нейронов

Похожие видео

0 Просмотры

10:03

Ткань Подготовка и иммуностоирование мыши Craniofacial тканей и недекализированных костей

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 29 августа 2026