Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:55 мин. • July 8th, 2025
Возьмем человеческие эмбриональные стволовые клетки, или чЭСК, в колбе, покрытой внеклеточным матриксом.
Замените среду средой для нервной индукции и инкубируйте, дифференцируя hESCs в колонии нейронных клеток-предшественников, или NPC.
Добавьте ферментативный раствор для диссоциации колоний.
Центрифугирование, удаление надосадочной жидкости и ресуспендирование клеток в индукционной среде с факторами роста для поддержки дифференцировки NPC.
Добавьте клеточную суспензию на микролунки обратной пирамидальной формы для формирования трехмерных нейросфер.
Перенесите нейросферы на пластину, покрытую внеклеточным матриксом, содержащую среду для дифференцировки с факторами роста и малыми молекулами. Инкубируйте при перемешивании, чтобы способствовать дифференцировке в дофаминергические прогениторные нейроны.
Замените среду средой для созревания нейронов и поместите нейросферы на мембранный диск во вставку из культуральной лунки, обеспечивая диффузию воздуха и питательных веществ.
Инкубируются в статических условиях с образованием трехмерных органоидов, состоящих из зрелых дофаминергических нейронов.
Эти органоиды, имитирующие развивающийся мозг, полезны для изучения дофаминергической дегене
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео