Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:24 мин. • July 8th, 2025
Начните с крысы под наркозом и сделайте разрез над глазной орбитой.
Рассеките подкожную клетчатку, чтобы получить доступ к орбитальной полости, в которой находится зрительный нерв.
Под микроскопом рассекают конъюнктиву, а затем подлежащую соединительную ткань.
Затем втяните окружающие мышцы и железу. Разрежьте защитные слои, чтобы обнажить зрительный нерв.
Зрительный нерв состоит из богатых липидами миелинизированных нервных волокон, которые передают электрические сигналы.
Далее возьмите предварительно собранную стеклянную микропипетку, наполненную лизолецитином, веществом, разрушающим липиды, и красителем для визуального отслеживания.
Введите микропипетку в обнаженный зрительный нерв и введите лизолецитин.
Зашите разрез кожи и нанесите мазь с антибиотиком, чтобы предотвратить инфицирование, после чего дайте крысе восстановиться.
В зрительном нерве введенный лизолецитин нарушает целостность миелиновой оболочки, окружающей нервные волокна.
Это приводит к локализованной демиелинизации, снижающей передачу сигнала через зрительный нерв.
Подготовьте животное к операции, как описано выше, и сделайте разрез кожи от 1 до 1,5 сантиметра над орбитой любого глаза. С помощью ножниц с тонкой радужной оболочкой раскройте подкожную клетчатку и получите доступ к полости глазницы. Затем под стереоскопом откройте конъюнктиву и переднюю капсулу Тенона.
Затем втяните экстраокулярные мышцы и внутриглазничные слезные железы, чтобы обнажить около 3 миллиметров зрительного нерва. Вокруг зрительного нерва с помощью офтальмологического лезвия откройте слои твердой мозговой оболочки и паутинной оболочки в продольном направлении, затем вставьте стеклянную микропипетку, прикрепленную к шприцу Гамильтона, в нерв на 2 миллиметра позади глазного яблока.
В течение 30 секунд введите болюс лизолецитина с красителем. Чтобы завершить процедуру, зашить разрез кожи, нанести мазь с антибиотиком для предотвращения инфекции, переместить животное на грелку и наблюдать за ним до тех пор, пока оно не выздоровеет.