Создание мышиной модели черепно-мозговой травмы с помощью ударного зонда

Начните с обездвиженной, обезболенной мыши с бритой головой.

Нанесите глазную мазь и продезинфицируйте кожу головы йодом.

Удалите излишки йода, и накройте мышь хирургической простыней.

Сделайте разрез по средней линии, чтобы обнажить череп и очистить рану.

Отметьте круг на одной стороне черепа, нацеливаясь на кору головного мозга.

Кора головного мозга содержит моторные и сенсорные нейроны, имеющие решающее значение для передачи сигналов между мозгом и телом.

Просверлите кость черепа над маркировкой по кругу, затем снимите костный лоскут, чтобы обнажить кору.

Поместите стерилизованный ударный щуп над открытой областью. Нанесите щуп на ткань, чтобы обеспечить высокое давление.

Это давление вызывает травму в коре головного мозга, нарушая работу двигательных и сенсорных нейронов и ухудшая передачу сигнала.

Очистите рану и зашите ее. Мышиная модель с черепно-мозговой травмой готова к дальнейшим экспериментам.

Чтобы выполнить одностороннюю краниэктомию, подтвердите отсутствие реакции на защемление пальца ноги у мыши, находящейся под наркозом, и закрепите мышь в стереотаксической раме. Нанесите на глаза офтальмологическую мазь с антибиотиком стерильным ватным тампоном, а на выбритую область кожи головы – раствор на основе йода. Удалите йод с 70% этанолом и накройте животное фенестрированной хирургической простыней.

Сделайте разрез средней линии размером от 1,5 до 2 сантиметров на коже головы и используйте стерильные ватные тампоны для очистки раны и очистки фасции слева от средней линии в брегме. Используйте импакторный зонд для определения места краниэктомии и установите x равно 0, y равно 0 стереотаксической контрольной точки для bregma. Отрегулируйте щуп сбоку на два миллиметра влево от средней линии. Используйте хирургически безопасный маркер с тонким наконечником, чтобы обозначить круг диаметром пять миллиметров вокруг предполагаемой области удара.

Поднимите и поверните ударный элемент из положения и завершите 5-миллиметровый круг. Кратковременно верните ударный элемент в исходное положение, чтобы проверить точность 5-миллиметрового круга. Затем поднимите и поверните ударный элемент из исходного положения и используйте высокоскоростной ручной инструмент для роторного микромотора, оснащенный круглым наконечником 0,6 или 0,8-миллиметрового сверла для птиц, чтобы сделать открытое отверстие в черепе с максимальной скоростью от 70% до 80%. Слегка надавите на череп во время сверления по 5-миллиметровому окружному контуру, чтобы истончить эту границу, и с помощью щипцов приподнять образовавшийся костный лоскут.

Сверление через линии швов может представлять дополнительную сложность, так как кость прерывается и требует дополнительного давления. Кровеносные сосуды могут находиться в тесной взаимосвязи, и поэтому вероятны кровотечения.

Чтобы вызвать легкую контролируемую кортикальную травму, очистите ударный щуп стерильной спиртовой прокладкой и переместите ударный щуп обратно в положение над открытой корой головного мозга. Опустите щуп до тех пор, пока он не коснется твердой мозговой оболочки, и отметьте это положение как z равно 0. Извлеките поршень, и двигайтесь к значению, равному минус 1 миллиметру, и разрядите поршень, чтобы ударить по коре головного мозга. Немедленно поднимите поршень и сдвиньте руку с места, орошите кору головного мозга щедрым объемом физиологического раствора, а также используйте простые прерывистые стежки и шелковый шов 5-0, чтобы закрыть разрез кожи головы.