$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Обезопасьте крысу под наркозом в стереотаксическом блоке.
Удалите шерсть с кожи головы и продезинфицируйте место разреза. Сделайте разрез по средней линии и втяните кожу, чтобы обнажить череп.
Удалите соединительную ткань, чтобы избежать помех для дрели. Определите брегму в качестве точки отсчета для определения координат моста, структуры, расположенной в стволе мозга.
Просверлите отверстие в черепе.
Вставьте щуп через отверстие, чтобы добраться до моста.
Далее подключите электроды к электрическому стимулятору, присоединив анод к зонду для стимуляции мозга, а катод — к уху крысы, чтобы завершить схему.
Подайте электрический импульс на мост, вызывая локализованное повреждение тканей или инфаркт.
После стимуляции ненадолго оставьте зонд на месте, чтобы стабилизировать эффект стимуляции.
Затем медленно снимите зонд и запечатайте место операции костным цементом.
Зашить разрез и вернуть крысу в клетку для восстановления и неврологического анализа.
Разогрейте грелку до 37 градусов Цельсия непосредственно перед анестезией, и прикрепите сверло для черепа к держателю на стереотаксической раме. Подтвердите отсутствие реакции на педальный рефлекс у первой крысы, подвергшейся анестезии, и установите крысу на стереотаксическую раму в положении лежа на грелке. Расположите ушные планки над ушным каналом, чтобы зафиксировать голову, следя за тем, чтобы череп оставался горизонтальным, чтобы избежать перекоса инъекции.
Нанесите мазь на глаза животного, а с помощью микробритвы удалите шерсть с черепа. С помощью маркера проведите 3-сантиметровую линию по средней линии черепа от линии двустороннего бокового кантуса до 0,5 сантиметра за задним родничком, а с помощью скальпеля сделайте разрез по средней линии вдоль отмеченной линии. Используйте ватный тампон, чтобы удалить кровь, и поместите кусок хирургической ленты с каждой стороны кожного лоскута, чтобы обнажить череп.
Используйте новый тампон, смоченный 0,9% хлорида натрия, чтобы аккуратно удалить любую соединительную ткань из черепа и найти брегму. С помощью маркера с тонким наконечником укажите центральную точку брегмы в качестве исходной точки. Установите сверло на расстоянии 6 миллиметров спереди-сзади, 2 миллиметра медиально-латерально. С помощью сверла аккуратно выполните трепанацию черепа диаметром 1 миллиметр. Далее замените дрель на щуп 22-го калибра с изолированной оболочкой, при этом наконечник должен быть расположен на 2 миллиметра выше проксимального конца ножны.
Вставьте оболочку на 7 миллиметров в мозг и продвигайте зонд вдоль оболочки до тех пор, пока верхняя часть зонда не окажется на 9 миллиметров ниже поверхности мозга. Подключите электроды к электростимулятору, а анод подсоедините к щупу. Затем подключите катод к уху крысы. Затем включите электрический стимулятор и установите длительность одиночного импульса равной 4050 миллисекундам, напряжение — 50 вольт, а ток — 4 миллиампера.
Оставьте зонд в нужном положении на пять минут после стимуляции, прежде чем извлечь устройство из мозга. Покройте трепанацию черепа костным цементом и дайте цементу высохнуть, прежде чем использовать полиамидные нити шовного материала 4-0 для закрытия раны. После трех-четырех стежков завяжите стандартные хирургические узлы 2-1-1. Затем внутрибрюшинно введите крысе 250 микролитров пенициллина и наблюдайте за крысой каждые 15 минут до полного пробуждения, прежде чем вернуть животное в клетку.