Выявление микрокровоизлияний в мозг на модели крысы

Церебральные микрокровоизлияния, или CMH, представляют собой нейровоспалительные кровоизлияния в мозг, вызванные нарушением гематоэнцефалического барьера, что приводит к утечке эритроцитов (эритроцитов) в ткани мозга.

Чтобы обнаружить CMH, начните с фиксированной ткани мозга крысы с CMH.

Погрузите ткань в сахарозу для криозащиты.

С помощью криомикротома разрежьте ткань и соберите срез на предметное стекло.

Вымойте для удаления остатков фиксатора.

Нанесите гематоксилин краситель, связанный с катионом металла, который взаимодействует с отрицательно заряженной ДНК, окрашивая ядро в красновато-фиолетовый цвет.

Затем нанесите кислоту-спирт, чтобы удалить излишки красителя, затем нанесите щелочное воронение, чтобы нейтрализовать кислую среду и преобразовать краситель в синюю форму, усиливая контраст.

Промойте салфетку спиртом для улучшения проникновения пятен, затем нанесите эозин для окрашивания эритроцитов в красно-оранжевый и розовый цвета компоненты ткани.

Обезвоживайте ткань с помощью повышения концентрации спирта и очистите ее ксилолом для микроскопической визуализации.

Захват изображений для обнаружения утечки эритроцитов красно-оранжевого цвета, подтверждающих CMH.

После изоляции