Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:00 мин. • July 8th, 2025
Возьмите мышь под наркозом с микроранками на подушечке лапы, которые обнажают слой базале, самый глубокий слой эпидермиса.
Этот слой содержит периферические нервные волокна, соединенные с ганглиями дорсального корешка, или DRG, рядом со спинным мозгом.
Нанесите на рану инокулюм вируса псевдобешенства, который нацелен на нервную систему, и потрите его стержнем иглы для усиления адсорбции.
Вирус связывается с рецепторами клеточной поверхности, что позволяет вирусу проникать и начинать репликацию.
Вирусные частицы распространяются на близлежащие клетки и попадают в периферические нервы.
Затем вирус попадает в DRG и распространяется через спинной мозг в головной мозг, заражая нейроны.
Инфицированные нейроны выделяют DAMP, активируя резидентную микроглию, которая выделяет цитокины и хемокины для привлечения макрофагов и нейтрофилов.
Эти иммунные клетки выделяют активные формы кислорода и протеолитические ферменты, которые повреждают нейроны, что приводит к нейровоспалению.
Местно нанесите 20 микролитров соответствующего титра вирусного инокулюма на стертую подушечку ноги. Проводят имитационные прививки средой только в истиранные подушечки лап контрольных животных параллельно. После каждого применения осторожно потирайте подушечку ноги 10 раз стержнем иглы, чтобы облегчить абсорбцию вируса, каждые 10 минут в течение 30 минут. Когда стертая подушечка лапы высохнет, дайте мышам восстановиться с мониторингом до полного лежания грудины, прежде чем помещать животных в отдельные клетки для клинического наблюдения и отбора проб.