Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:31 мин. • July 8th, 2025
В мозге рыбок данио нейроны экспрессируют орексин и каннабиноидные рецепторы, которые регулируют обмен веществ.
У рыбок данио-рерио, страдающих ожирением, вызванным диетой, эти рецепторы все чаще колокализуются, образуя гетеромеры, изменяя нисходящую сигнализацию и влияя на метаболическую регуляцию.
Возьмите криорезы тканей мозга как у контрольной рыбки, так и у рыбок данио-рерио. Промойте секции буфером, чтобы удалить заделывающую среду.
Обработайте буфером, блокирующим пермеабилизацию, для проникновения в клеточные мембраны и маскировки неспецифических сайтов связывания. Промойте, чтобы удалить излишки буфера.
Инкубируйте с первичным коктейлем антител, нацеленным на рецепторы. Промойте, чтобы удалить несвязанные антитела.
Инкубируйте с различными вторичными антителами, меченными флуорофорами, которые связываются с первичными антителами. Промойте, чтобы удалить несвязанные антитела.
Добавьте флуоресцентный ДНК-связывающий краситель для маркировки ядра. Затем нанесите монтажный материал и загерметизируйте секции покровным стеклом.
С помощью конфокального микроскопа обнаружить флуоресценцию антител. Повышенная колокализация антител у рыбок данио DIO по сравнению с контрольной группо
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео