Индукция дискинезий, индуцированных леводопой, на крысиной модели болезни Паркинсона

Возьмите шприц, наполненный леводопой, предшественником дофамина и ингибитором преобразования дофамина.

Введите этот раствор в подкожную клетчатку скованной крысы с болезнью Паркинсона, у которой повреждены нейроны, продуцирующие дофамин.

У крыс ингибитор связывается с ферментами, продуцирующими дофамин, и предотвращает преждевременное превращение леводопы в дофамин.

Леводопа попадает в кровоток, пересекает гематоэнцефалический барьер через аминокислотные каналы и попадает в неповрежденные нейроны, продуцирующие дофамин.

Ферменты в этих нейронах превращают леводопу в дофамин, возбуждающий нейромедиатор, и высвобождают его в синапс.

Дофамин связывается со своими рецепторами на постсинаптических нейронах, запуская передачу сигнала.

Периодически повторяйте инъекции, чтобы увеличить выработку дофамина.

Со временем избыток дофамина приводит к чрезмерной стимуляции его рецепторов и чрезмерной передаче нейронной сигнализации, что в конечном итоге нарушает движения тела крысы.

Поместите крысу в клетку и понаблюдайте за ее поведением. Крыса демонстрирует непроизвольные, повторяющиеся движения тела, известные как дискинезии, вызванные леводопой.

Перед введением L-DOPA добавьте соответствующий объем стерильного физиологического раствора в предварительно взвешенную, лиофилизированную смесь L-DOPA и бенсеразида в янтарном флаконе и хорошо встряхивайте в течение 10 секунд. Сразу после приготовления засыпьте необходимый объем смеси L-ДОПА-бенсеразида для каждого животного в индивидуальные шприцы, смонтированные с помощью иглы 26 калибра, и промаркируйте каждый шприц индивидуальной идентификацией животного.

После того, как вы поднесете первую клетку к столу для инъекций, извлеките крысу из клетки, чтобы поместить ее на поверхность для инъекций. Недоминирующей рукой удерживайте голову и плечи крысы ладонью к поверхности, а большим и указательным пальцами затряхивайте кожу на тыльной стороне, покрывающую лопатки. Используйте доминирующую руку для введения объема L-DOPA в подкожное пространство между пальцами, держа иглу параллельно телу, чтобы избежать внутримышечного введения.

После инъекции переместите крысу в клетку. Далее установите таймер на одну-две минуты и повторяйте процедуру, вводя по одной крысе каждые одну-две минуты, пока не будут введены все крысы. В день оценки установите таймер рядом с клеткой, чтобы наблюдать за дискинезией, вызванной леводопой, или интенсивностью поведения LID, одновременно оценивая частоту любого заданного поведения в течение периода оценки.

Оцените интенсивность и частоту движений при дистонической и гиперкинетической дискинезии, включая начальное начало поведения LID, пиковое поведение и фазу спада в желаемое количество временных точек. Если вы используете интервалы оценки в одну минуту, установите таймер на одну минуту, чтобы оценить первую крысу, и продолжайте оценку по всем крысам с интервалом в одну минуту.