Иммуногистохимическое окрашивание белка S-100 в срезах ректальной аспирационной биопсии человека
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:02 мин. • July 8th, 2025
Возьмите несъемные биопсию ректальной аспирации человека с экспонированными белковыми антигенами и инактивированными эндогенными пероксидазами.
Добавьте блокирующий раствор для предотвращения связывания неспецифических антител.
Замените блокирующий раствор первичными антителами, которые связываются с белком глиальных клеток-мишени, S-100, маркером болезни Гиршпрунга.
Удалите несвязанные антитела и инкубируйте с полимерами пероксидазы для усиления сигнала.
Вымойте для удаления излишков полимера. Добавляйте вторичные антитела, которые связываются с ферментными полимерами и первичными антителами.
Удалите несвязанные антитела и добавьте хромогенный субстрат.
Пероксидазы вступают в реакцию с субстратом, образуя окрашенный осадок.
Промойте для удаления излишков осадка.
Добавьте краситель для окрашивания ядер.
Постирайте кислотно-этаноловым раствором, чтобы удалить излишки красителя.
Затем обезвоживайте срезы с помощью возрастающей концентрации этанола, а затем ксилола.
Наконец, установите и наблюдайте под микроскопом, чтобы визуализировать окрашивание, указывающее на присутствие целевого белка.
Выбросьте избыток бычьего сывороточного альбумина и пометьте клетки 50 микролитрами первичного
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео