Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:29 мин. • July 8th, 2025
Возьмем, к примеру, мышь под наркозом, которой имплантировали направляющую канюлю в мозг.
Фиктивный щуп внутри канюли предотвращает попадание остатков тканей.
Наденьте ошейник на шею мыши.
Замените фиктивный зонд на микродиализный зонд, содержащий специализированную полупроницаемую мембрану, которая пропускает молекулы с высокой молекулярной массой.
Зонд подключается к насосам через впускные и выпускные отверстия для регулирования потока физиологического буфера.
Привяжите мышь внутри клетки с помощью ошейника, дайте ей восстановиться и запустите поток.
Буфер поступает в ткань мозга через входное отверстие и смешивается с интерстициальной жидкостью, или ISF, во внеклеточном пространстве, которая содержит белки, участвующие в клеточной коммуникации.
Компоненты диффундируют по мембране и собираются через выпускное отверстие во фракции.
Собранный ISF, содержащий внеклеточные белки, готов к анализу.
Наденьте ошейник на шею животного, которому имплантировали анестезированную направляющую канюлю, и снимите колпачковую гайку и муляж щупа. Медленно введите зонд для микродиализа через направляющую канюлю и закрепите колпачковую гайку.
Затем поместите мышь в клетку, подключенную к свободно движущейся системе, и привяжите мышь к ошейнику. По прошествии не менее одного часа последовательно остановите роликовый насос и шприцевой насос, повторно запустив насосы со шприцевым насосом, настроенным на 20% быстрее, чем роликовый насос, и поместите свободный конец выпускной трубки на охлаждаемый коллектор фракций для сбора мозгового ISF. Когда будет получен соответствующий экспериментальный объем, извлеките зонд и выполните восстановление мыши, как показано выше.