Вирусная инфекция нейральных стволовых клеток плода вирусом Зика

Возьмем суспензию вируса Зика, патогенного вируса, имеющего нужную кратность заражения, соотношение вирусных частиц к клеткам.

Смешайте суспензию вируса с нейральными стволовыми клетками мозга плода человека.

Инкубируйте смесь, позволяя вирусу связываться с рецепторами на клетках, способствуя вирусному эндоцитозу.

Далее центрифугируйте смесь и выбросьте надосадочную жидкость, содержащую неинтернализованные вирусные частицы.

Ресуспендируйте инфицированные вирусом клетки в среде и засейте их в многолуночную пластину, покрытую белком внеклеточного матрикса, что обеспечивает адгезию клеток.

Инкубируйте тарелку.

Интернализованный вирус Зика использует механизмы клетки-хозяина для производства новых вирусных частиц.

Репликация вируса значительно изменяет морфологию клеток, вызывая повреждение клеток и способствуя распространению инфекции на соседние клетки.

Клетки, инфицированные вирусом Зика, могут быть использованы для дальнейшего анализа.

Повторно суспендируйте гранулу в запасе ZIKV при кратности инфекции, или MOI, от 1 до 10. Объем раствора ЗИКВа не должен превышать 0,5 миллилитров. Инкубируйте образцы при температуре 37 градусов Цельсия в течение одного часа. После этого переверните