Иммуногистохимическое окрашивание нервных волокон в базальном ядре Мейнера головного мозга мыши

Возьмите неподвижный участок мозга мыши, содержащий базалис Мейнерта, богатый нервными волокнами, экспрессирующими фермент холинацетилтрансферазу.

Секция предварительно обработана для дезактивации эндогенной пероксидазы.

Добавьте моющее средство для проникновения клеточных мембран, а затем блокирующий раствор для предотвращения связывания неспецифических антител.

Замените раствор первичными антителами, которые связываются с холинацетилтрансферазой.

Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные антитела. Инкубируйте с меченными биотином вторичными антителами, которые связываются с первичными антителами.

Удалите несвязанные антитела и добавьте авидин-биотин-пероксидазные комплексы, которые связываются с вторичными антителами.

Умывайтесь для удаления излишков комплексов.

Добавьте хромогенный субстрат, который вступает в реакцию с пероксидазой, образуя окрашенный осадок.

Смойте дистиллированной водой, чтобы удалить излишки осадка.

Перенесите срез на желатинизированное предметное стекло.

Затем обезвожьте секцию с помощью увеличивающейся концентрации этанола, а затем ксилола.

Установите срез и понаблюдайте под микроскопом, чтобы визуализировать окрашенные нервные волокна.

Для иммуногистохи