Оценка двигательных нарушений у моделей C. elegans с помощью радиального локомоционного анализа

Возьмем чашки Петри, содержащие равномерное распределение пищи червей на нематодных питательных средах.

Переверните каждую пластину и отметьте центр.

С помощью микроскопа введите червей Caenorhabditis elegans в центрально отмеченное место.

Затем введите червей соответствующего возраста на оставшиеся пластины.

Эти черви экспрессируют либо дикий тип, либо мутантные формы человеческого РНК-связывающего белка, который образует токсичные агрегаты в цитоплазме нейронов и приводит к гибели нейронов.

Это снижает способность червей контролировать движения мышц, что приводит к нарушению двигательной функции.

Дайте червям ползти в течение определенного периода времени.

С помощью микроскопа отметьте конечное местоположение каждого червя.

Измерьте радиальное расстояние, пройденное червями от центрального пятна до их конечного положения.

По сравнению с контрольной группой, черви, экспрессирующие более низкие уровни белка дикого типа, демонстрируют легкие двигательные нарушения, черви с более высокими уровнями белка дикого типа демонстрируют умеренные нарушения, а черви с мутантным белком демонстрируют серьезные нарушения.

Переверните пластины для анализа NGM вверх дном и пометьте дно идентификат