Модель in vitro для изучения пересечения патогеном гематоэнцефалического барьера и инфекции клеток мозга

Возьмем модель гематоэнцефалического барьера in vitro, состоящую из двух отсеков, разделенных пористой мембраной.

Верхнее или просветное отделение содержит микрососудистые эндотелиальные клетки. Эти клетки экспрессируют плотные соединения, имитируя эндотелий гематоэнцефалического барьера, который ограничивает прохождение клеток и молекул.

Нижнее, или алюминальное, отделение содержит нейроны, астроциты и микроглию, представляющую собой паренхиму мозга.

Введите нейротропный вирус в просветный компартмент для имитации инфекции, передающейся через кровь, и инкубируйте.

Вирус эндоцитозируется эндотелиальными клетками, совершает внутриклеточный транспорт в везикулах и высвобождается на аблюминальной стороне.

После инкубации снимите верхнюю камеру. Образец среды с алюминальной стороны для оценки вирусного количества, подтверждающего успешное просекание эндотелиального слоя.

Добавьте свежую среду и снова инкубируйте.

Вирус проникает в нервные клетки через эндоцитоз, реплицируется и высвобождает вирусное потомство.

Количественно оцените повышенную внеклеточную вирусную нагрузку для подтверждения вирусной нейроинвазии и репликации.

После создания мини-устройства для мозга BBB, как показано н