Оценка мышечного сокращения с помощью нервно-мышечных блокаторов

Начните с планшета, содержащего культивируемые миелинизированные моторные нейроны, нервные клетки, контролирующие мышцы, и миотрубки, многоядерные мышечные клетки.

Моторный нейрон связан с миотрубкой через нервно-мышечное соединение или NMJ, место передачи сигнала.

Добавьте в лунку хлористый кальций.

Наблюдайте под перевернутым микроскопом для получения изображений в реальном времени и записывайте видеоролики.

Ионы кальция попадают в двигательный нейрон и вызывают высвобождение ацетилхолина, или АЧ, возбуждающего нейромедиатора.

Эти нейротрансмиттеры связываются с рецепторами ACh на миотрубках, позволяя ионам натрия проникать внутрь и вызывая сокращение миотрубок.

Запишите фильм. Затем программное обеспечение генерирует график с цветовой кодировкой для сокращений миотрубки, где красный цвет обозначает самую высокую скорость, а синий — самую медленную.

Далее вводят нервно-мышечный блокатор, который связывается с рецепторами АЧ. Это предотвращает приток натрия и ограничивает сокращения миотрубок.

Перезапишите фильм. Уменьшение красного цвета свидетельствует об уменьшении сокращений миотрубки.

Чтобы вызвать сокращения миотрубки, добавьте 25 миллимолярных хлоридов кальция в каждую лунку дифференцированных клеток нервно-мышечного соединения. И в течение одной-двух минут обработки поместите пластину на предметное столик инвертированного микроскопа. Используя микроскопию живых клеток, запишите фильм о сокращении миотрубки в течение 20 секунд. В конце записи добавьте 300 нанограммов на миллилитр кураре в питательную среду и запишите фильм еще на 20 секунд, прежде чем открыть файл фильма в соответствующей программе для анализа векторов движения.