Сшивание белков нейронной поверхности в мозге мыши с помощью химического анализа сшивки

0 просмотров • 3:47 мин. • July 8th, 2025

Начнем с изолированного мозга мыши в ледяном буфере.

Перенесите мозг в мозговую матрицу вентральной стороной вверх.

Вставьте бритвенные лезвия, чтобы последовательно разрезать переднюю часть мозга.

Поднимите ломтики, удерживая лезвия вместе, оставляя заднюю часть позади. Отделите лезвия бритвы и положите их на охлажденную поверхность срезами мозга вверх.

Выберите нужный срез и извлеките интересующую область.

Разделите и пропустите через мясорубку.

Переложите измельченную ткань в трубку, содержащую спинномозговую жидкость с добавлением химического препарата BS3.

Переверните и перемешайте трубку, чтобы разбить ткань на более мелкие кусочки, затем инкубируйте с вращением.

BS3, химическое вещество, непроницаемое для клеточных мембран, сшивает поверхностные белки нейронов, такие как рецепторы ГАМК, в то время как внутренние рецепторы ГАМК остаются неизменными.

Добавьте глицин для гашения реакции сшивания.

Образец готов для оценки уровня поверхностных ГАМК-рецепторов.

Для начала быстро удалите мозг из черепа усыпленной черной мыши C57 6J. Погрузите его в чашку Петри, содержащую ледяной PBS, на 10-15 секунд. Поместите охлажденный мозг в мозговую матрицу на льду лицевой стороной вверх. Что

Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео

Войти

Больше видео

Сшивание BS3