Обработка мозга мыши для последующего анализа

Возьмите свежесобранный мозг мыши и заморозьте его в предварительно охлажденном изопентане для быстрой сохранности тканей.

Затем перенесите мозг корой вверх в замороженную мозговую матрицу, чтобы поддерживать холодную среду во время нарезки.

Позвольте мозгу уравновеситься до температуры матрицы. Выровняйте его в матрице по сагиттальной и поперечной пазухам, чтобы обеспечить симметричность сечений.

Вставьте охлажденные лопасти в мозг, обеспечив правильное выравнивание.

Затем равномерно прижмите их, чтобы получить однородные участки мозга.

Снимите лезвия с секциями и расположите их ростральной стороной вверх на пластине из замороженного стекла.

Организуйте секции от ростральной до каудальной ориентации в правильном анатомическом порядке. Теперь разделите их.

Используя подходящий референс для мозга, найдите и вырежьте интересующую область из разреза.

Переложите иссеченную ткань в предварительно охлажденный флакон для последующего анализа.

После удаления мозга у усыпленных взрослых мышей дикого типа CD-1 флэш замораживают ткань на 60 секунд в жидком азоте или изопентане, предварительно охлажденном сухим льдом, и хранят ее при температуре -80 градусов Цельсия.

За 24 часа до вскрытия тка