Иммуногистохимия участков мозговой ткани мыши для нацеливания на дофаминовые нейроны

0 просмотров2:42 мин • April 29th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Возьмите слайд с полимерным покрытием со срезами ткани мозга мыши, содержащими дофаминовые нейроны, экспрессирующие тирозингидроксилазу, ключевой фермент для синтеза дофамина.
Обведите срезы гидрофобной ручкой, чтобы обеспечить равномерное окрашивание.
Зафиксируйте ткань в растворе ацетона-метанола для сохранения морфологии ткани.
Промойте буфером, содержащим моющее средство, чтобы проникнуть в клеточные мембраны.
Инкубируйте с первичными антителами, нацеленными на тирозингидроксилазу в дофаминовых нейронах, затем промойте для удаления несвязанных антител.
Добавьте флуоресцентные меченные красителем вторичные антитела, ядерный краситель и ингибиторы РНКазы.
Во время инкубации вторичные антитела связываются с первичными антителами, ядерные красители помечают ядро, а ингибиторы РНКазы инактивируют РНКазы.
Промойте буфером. Затем обезвоживайте участки тканей в возрастающих концентрациях этанола.
Инкубируйте в ксилоле, чтобы очистить ткань.
Обработанные участки ткани теперь готовы к микродиссекции лазерного захвата, которая позволяет точно визуализировать и препарировать целевые дофаминовые нейроны.

Чтобы провести иммуногистохимию, используйте гидрофобную ручку, чтобы обвести ткань и дать ей высохнуть. Затем в растворе метанола ацетона 1 к 1 зафиксируйте ткань при отрицательной температуре 20 градусов Цельсия на 10 минут. После извлечения салфетки из морозильной камеры накройте срезы от 100 до 200 микролитров антитела тирозингидроксилазы в PBS и 1% тритона на 10 минут.

Затем используйте PBS с 1% тритоном для промывки слайдов, прежде чем покрывать секции от 100 до 200 микролитров козьего антикроличьей IgG, помеченного Alexa Fluor 488. Выдерживайте в течение пяти минут, а затем дважды промывайте предметные стекла с помощью PBS. Затем обезвоживайте образцы в градуированной серии свободного этанола РНКазы в течение 30 секунд каждая, как было показано ранее в этом видео. Выдерживать в ксилоле в течение одной минуты и второй промывки в течение пяти минут. Снимите предметные стекла непосредственно перед использованием для LCM и дайте им высохнуть на воздухе.

07:01

Выделение РНК из клеточных конкретные подгруппы с помощью лазера захвата микродиссекции в сочетании с быстрым иммунноокрашивания

Похожие видео

0 Просмотры

07:42

Лазерная захвата микродиссекция человеческого эпителия простаты для анализа РНК

Похожие видео

0 Просмотры

09:31

Помощью лазера микродиссекция (LAM) в качестве инструмента для транскрипционные Профилирование отдельных типов клеток

Похожие видео

0 Просмотры

03:14

Иммуногистохимия для идентификации области locus coeruleus в срезах мозга мыши

Похожие видео

0 Просмотры

02:58

Иммуногистохимическое окрашивание нервных волокон в базальном ядре Мейнера головного мозга мыши

Похожие видео

0 Просмотры

03:04

Иммуноокрашивание нейронов в срезах мозга мышей после флуоресцентной гибридизации in situ

Похожие видео

0 Просмотры

07:30

Грунтовка для иммуногистохимии Cryosectioned ткани мозга крыс: Пример окрашивания для микроглии и нейронов

Похожие видео

0 Просмотры

09:35

Экологические модуляций Количество мозга допамина нейронов у взрослых мышей

Похожие видео

0 Просмотры

08:19

Стереологических Оценка числа дофаминергических нейронов в Substantia мыши, с помощью оптических фракционатор и стандартных микроскопии оборудование

Похожие видео

0 Просмотры

07:44

Локализация Локус пятно в мозг мыши

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 1 августа 2026