Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 5:13 мин. • April 28th, 2025
Возьмем адаптацию к темному, обезболивающую, трансгенную, белоглазую муху.
Муха экспрессирует ионные каналы TRPL, помеченные eGFP, в фоторецепторах глаза.
В темноте TRPL локализуется на мембранах рабдомеров — микроворсинках фоторецепторов.
Используя сжатый воздух, вдавите муху головой вперед в наконечник пипетки.
Обрежьте кончик и отодвиньте ширинку назад.
Снова обрежьте его и вытолкните муху вперед, пока не будет выступать только ее голова.
Обездвижите кончик пластилина, прикрепленного к предметному стеклу, и поместите его на предметный столик флуоресцентного микроскопа так, чтобы глаз был обращен к объективу микроскопа радиально.
Добавьте каплю воды на объектив, затем опустите его, пока он не коснется глаза.
Захват изображений фоторецепторов.
Измерьте интенсивность флуоресценции в рабдомерах, теле клетки и фоне.
Осветите муху оранжевым светом, чтобы вызвать транслокацию TRPL к телу клетки.
Повторите измерения изображений и флуоресценции.
Сравните изображения, чтобы наблюдать сниженную рабдомерную флуоресценцию после освещения, указывающую на транслокацию TRPL в тело клетки.
Чтобы приготовить муху в нелетальном варианте, перенесите обезболенную льдом муху головой вперед в наконечник пипетки
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео