Индукция нейропатической боли у крысы путем сужения подглазничного нерва
JoVE Encyclopedia of Experiments
Нейронауки
0 просмотров • 4:39 мин • April 28th, 2025
Закрепите крысу под наркозом с бритой головой в стереотаксической раме. Нанесите мазь на глаза, чтобы предотвратить высыхание, и накройте хирургической простыней
Продезинфицируйте голову и надрезайте, чтобы обнажить череп.
Используя микроскоп для препарирования, визуализируйте одну из глазных орбит, костную полость в черепе, в которой находится глаз.
Отклоняйте окружающие мягкие ткани, чтобы обнажить инфраорбитальный нерв, который передает сенсорные сигналы от лица к мозгу.
Свяжите две лигатуры вокруг подглазничного нерва, чтобы сузить его и вызвать повреждение нерва.
Зашить разрез кожи головы и дать крысе восстановиться.
После сужения нерва поврежденные нейроны выделяют сигнальные молекулы, которые рекрутируют иммунные клетки.
Эти иммунные клетки выделяют медиаторы, которые связываются с соседними интактными ноцицепторами, сенсорными нейронами, которые передают боль.
Это связывание медиатора сенсибилизирует ноцицепторы, увеличивая возбудимость нейронов и генерируя болевые сигналы, которые поступают в мозг, способствуя нейропатической боли.
В приготовлении отрежьте два шестисантиметровых кусочка хромированной кишки 5-0. Храните их в посуде со стерильным физиологическим раствором, чтобы они не застыли. Убедившись, что крыса находится под наркозом из-за отсутствия рефлекторной реакции, начните готовить ее к операции, побрив голову для разреза средней части головы. Брейте в радиусе 25 миллиметров от центральной точки глаз.
Далее зафиксируйте голову крысы в стереотаксической рамке и подложите под тело крысы грелку. Затем нанесите немного офтальмологической мази. И очистите выбритый участок чередующимися спиртовыми и бетадиновыми скрабами. Начните операцию с разреза по средней линии кожи головы, чтобы обнажить череп и носовую кость.
Продолжайте операцию с помощью диссекционного микроскопа. Далее с помощью щипцов освободите край глазницы, образованный из верхнечелюстной, лобной, слезной и скуловой костей. Кроме того, при необходимости сдавайте кровь.
Теперь, чтобы получить доступ к IoN, аккуратно отклоните содержимое орбиты с помощью точной ватной палочки. При этом не перенапрягайте передний решетчатый нерв, который пересекается выше IoN. Затем с помощью щипцов с помощью растягивающих движений рассекайте IoN, свободный от окружающей соединительной ткани. Всегда берите мазок с кровотечением по мере необходимости.
Теперь поместите кусок лигатуры между IoN и лобной костью, протолкнув один конец вниз вдоль лобной кости, медиально к IoN, а затем продвинув его на несколько миллиметров параллельно IoN, оставаясь ниже IoN. Затем просуньте кончик щипцов под углом 45 градусов под IoN, близко к лигатуре, и аккуратно втяните IoN в сторону, обнажив лигатуру и кончики щипцов.
Возьмитесь за лигатуру и проденьте ее под IoN, вытягивая ее до тех пор, пока открытые длины не станут ровными. Затем завяжите концы скользящим узлом и наденьте узел на IoN. Заметно слегка сожмите нерв и затяните узел, чтобы он не мог соскользнуть дальше.
Теперь отрежьте свободные концы лигатуры и поместите другую лигатуру по той же технике, в двух миллиметрах от первой лигатуры. Визуально подтвердите правильность расстановки лигатур.
Завершите операцию, закрыв кожу головы швом из полиэстера 4-0. Затем наблюдайте за тем, как крыса выздоравливает, на подогреваемой подушке. Когда у него снова обретется лежачее положение на грудине, верните его в подходящую клетку. Крысу следует содержать в одиночестве до тех пор, пока она полностью не выздоровеет.
Обзор
В данной статье подробно описывается хирургическая процедура по индуцированию повреждения нерва у крысы под наркозом, с основным акцентом на подглазничный нерв. Методология включает подготовку, хирургическую технику и послеоперационный уход.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Нейронаука
- Нейробиология
- Механизмы боли
Теоретическая часть
- Подглазничный нерв играет ключевую роль в передаче сенсорных сигналов от лица в головной мозг.
- Повреждение нерва может привести к нейропатической боли, что является важной областью исследований в области изучения боли.
- Понимание механизмов повреждения нерва и последующей передачи болевых сигналов необходимо для разработки методов лечения.
- Данная процедура позволяет исследовать роль иммунных клеток в развитии нейропатической боли.
Цель исследования
- Индуцировать и изучить эффекты перевязки подглазничного нерва на модели крысы.
- Наблюдать за последующим иммунным ответом и механизмами передачи болевых сигналов.
- Представить детальную методику для исследователей, занимающихся изучением нейропатической боли.
Используемые методы
- Анестезия и подготовка крысы.
- Хирургическое обнажение подглазничного нерва.
- Наложение лигатур для индуцирования констрикции нерва.
- Послеоперационный мониторинг и уход за животным.
Основные результаты
- Было достигнуто успешное пережатие подглазничного нерва.
- Были установлены протоколы послеоперационного восстановления.
- Привлечение иммунных клеток и сенсибилизация ноцицепторов были отмечены как ключевые реакции на повреждение нерва.
- Данная методология представляет собой надежную модель для изучения нейропатической боли.
Выводы
- Данная хирургическая методика эффективно моделирует повреждение нерва и его последствия.
- Представления об иммунных ответах могут помочь в разработке будущих стратегий купирования боли.
- Это исследование вносит вклад в понимание механизмов нейропатической боли.
Часто задаваемые вопросы
Значимость для промышленности
Надежные доклинические модели нейропатической боли имеют важное значение для валидации мишеней и снижения механистических рисков при разработке терапевтических средств для лечения боли. Модель перевязки подглазничного нерва позволяет проводить количественную оценку путей передачи болевых сигналов и иммунно-нейронных взаимодействий, имеющих значение при тригеминальных нейропатиях. Данный подход повышает прогностическую достоверность на ранних этапах поиска и идентификации ведущих соединений для развития портфеля анальгетиков.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранние этапы поиска и валидация мишени
- Позволяет исследовать механизмы путей передачи боли и иммунно-нейронное взаимодействие.
- Обеспечивает функциональную валидацию мишеней, участвующих в развитии нейропатической боли.
- Способствует снижению mechanistic-рисков путем моделирования клинически значимого повреждения нерва.
- Предоставляет платформу для проверки гипотез при оценке новых мишеней для анальгетиков.
Скрининг и разработка анализа
- Позволяет создать воспроизводимую систему in vivo для количественной оценки болевого поведения.
- Способствует стандартизации протоколов индукции и измерения боли.
- Обеспечивает возможность последующего скрининга соединений-кандидатов на предмет анальгетической эффективности.
- Облегчает подготовку анализа для рабочих процессов трансляционных исследований боли.
Трансляционные и доклинические исследования
- Моделирует клинически значимую нейропатию тройничного нерва для согласования трансляционных биомаркеров.
- Обеспечивает преемственность от изучения механизмов развития заболевания до доклинических испытаний эффективности.
- Поддерживает риск-ориентированное продвижение кандидатов в анальгетики на основе валидации in vivo.
- Позволяет оценивать иммунные и нейрональные биомаркеры в контролируемых условиях.
Интеграция в конвейер и рабочий процесс
Данная модель находится на стыке этапов раннего поиска и доклинической валидации, связывая механизмы действия с идентификацией ведущих соединений для терапии боли.
- Фундаментальная биология: Облегчает проверку гипотез о передаче болевых сигналов и иммунной активации после повреждения нерва.
- Скрининг: Обеспечивает стандартизированную платформу для воспроизводимого количественного определения болевого поведения.
- Аналитика: Позволяет измерять поведенческие и молекулярные конечные точки для сравнительного анализа.
- Трансляционные исследования: Соответствует механизмам нейропатической боли, имеющим значение для заболевания, с целью разработки биомаркеров.
- Корпоративное повторное использование: Служит многократно используемой доклинической моделью для различных программ НИОКР в области анальгетиков.
Операционное и корпоративное влияние
- Научная ценность: Повышает прогностическую достоверность и снижает механистическую неопределенность при валидации мишеней боли.
- Операционная ценность: Обеспечивает стандартизацию, воспроизводимость и масштабируемость моделирования нейропатической боли.
- Стратегическая ценность: Помогает в принятии решений о продолжении или прекращении разработки («go/no-go») и повышает эффективность использования капитала при поиске анальгетиков.
- Влияние на портфель: Позволяет осуществлять приоритезацию кандидатов в терапию боли с учетом рисков.
Особенности реализации
- Требуется опыт в области микрохирургии грызунов и оценки болевого поведения.
- Необходим доступ к стереотаксическим установкам, диссекционным микроскопам и валидированным материалам для перевязки.
- Требуется стандартизация хирургических и поведенческих протоколов между исследовательскими группами.
- Может потребоваться адаптация для различных линий грызунов или моделей нейропатии.
- Ограничения включают специфичность модели для повреждения тройничного нерва и ограниченность трансляционного охвата.
Часто задаваемые вопросы по биофармацевтике
Механический анализ избегания конфликтов для измерения болевого поведения у мышей
Похожие видео
0 Просмотры
Оценка механической гиперчувствительности, вызванной повреждением нервов, у крыс с использованием анализа орофациальной оперантной боли
Похожие видео
0 Просмотры
Хроническое констрикционное повреждение дистального инфраорбитального нерва (DIoN-CCI) у мышей для изучения нейропатической боли тройничного нерва
Похожие видео
0 Просмотры
Хронический Сужение седалищного нерва и боль Гиперчувствительность тестирования у крыс
Похожие видео
0 Просмотры
Индуцирование повреждения лицевого нерва у модели крысы
Похожие видео
0 Просмотры
Индуцирование орофациальной нейропатической боли у модели крысы с помощью перевязки инфраорбитального нерва
Похожие видео
0 Просмотры
Индукция повышенного внутриглазного давления у модели крысы
Похожие видео
0 Просмотры
Седалищный нерв наручников Модель нейропатической боли у мышей
Похожие видео
0 Просмотры
Хронический Сужение Травма крысы подглазничного нерва (ION-ТПП) для изучения невралгия тройничного нейропатической боли
Похожие видео
0 Просмотры
Частичная перевязка седалищного нерва: мышиная модель хронической нейропатической боли для изучения антиноцицептивного эффекта новых методов лечения
Похожие видео
0 Просмотры
Последнее обновление: 29 августа 2026