Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:47 мин. • April 28th, 2025
Начните с пептидов, полученных из гранул нейромеланина (NMG), выделенных из посмертной ткани человеческого мозга.
NMGs, обнаруженные в нейронах, производящих допамин, содержат пигмент нейромеланин, белки и липиды.
Возьмем колонку высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), содержащую стационарную фазу на основе диоксида кремния, функционализированную гидрофобными лигандами.
Загрузите пептиды в столбец.
Гидрофобные пептиды связываются с колонкой сильнее, чем гидрофильные.
Пропустите буфер элюирования через столбец.
Менее гидрофобные пептиды сначала вымываются, в то время как более гидрофобные вымываются позже.
Элюированные пептиды поступают в источник ионизации электроспрея масс-спектрометра, где они ионизируются в заряженные пептидные ионы.
Ионизированные пептиды затем поступают в масс-анализатор, где они разделяются на основе их отношения массы к заряду.
Выбранный пептидный ион направляется в ячейку столкновения и фрагментируется на более мелкие ионы, отношение массы к заряду которых измеряется снова.
Наконец, данные сравниваются со справочной базой данных для идентификации белков, присутствующих в образце NMG.
После выполнения триптического разложения, как описано в тексте, подготов
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео