Характеристика сфероидов нейроэндокринных опухолей тонкой кишки с помощью иммунофлюоресценции

0 просмотров2:38 мин • April 28th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Возьмите сфероиды нейроэндокринных опухолей тонкой кишки в пробирке.

Добавьте фиксативный раствор для сохранения клеток.

Чтобы промыть, центрифугировать и заменить фиксатор на буфер.

Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость, чтобы удалить остатки фиксатора.

Добавьте буфер, содержащий моющее средство и блокирующий агент, чтобы проникнуть в клеточные мембраны и предотвратить связывание неспецифических антител.

Постирайте с буфером, чтобы удалить излишки моющего средства и блокирующего средства.

Инкубируйте с первичными антителами, которые связываются с белком-мишенью, специфичным для нейроэндокринной клетки.

Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные антитела.

Добавьте помеченные флуорофором вторичные антитела, которые связываются с первичными антителами.

Промойте буфером для удаления избытка антител.

Добавьте монтажную среду, содержащую краситель для окрашивания ядра.

Перенесите сфероиды на слайд и закрепите с помощью защитного стекла.

Используйте флуоресцентный микроскоп для визуализации нейроэндокринных клеток сфероида, экспрессирующих специфические белки.

Исправьте органоиды, добавив 500 микролитров параформальдегида и инкубируя их в течение 15 минут. После инкубации дважды промойте культуру 1 миллилитром PBS. Добавьте 500 микролитров PBS с 3% BSA и 0,1% Triton X-100 для проникновения культуры. Инкубируйте пробирку в течение пяти минут, затем трижды промойте органоиды 1 миллилитром PBS и 3% BSA.

Затем инкубируйте культуру с первичными антителами в течение одного часа, затем повторите промывки с PBS и BSA. Инкубируйте со вторичными антителами и повторите промывки, убедившись, что все надосадочная жидкость аспирирована и отброшена.

Чтобы получить изображение сфероидов, добавьте 5 микролитров монтажной среды, содержащей DAPI, и используйте пипетку P20, чтобы перенести 5 микролитров сфероидов на предметное стекло. Запечатайте предметное стекло защитным накладкой и сделайте изображение с помощью флуоресцентного микроскопа с объективами 10, 20 и 40 раз.

05:54

Поколение высокопроизводительных трехмерных опухоли сфероидов для скрининга наркотиков

Похожие видео

0 Просмотры

10:03

Физиологические пациент выведенных 3D сфероидов для анти-неопластических наркотиков скрининга целевой рак стволовых клеток

Похожие видео

0 Просмотры

10:38

Создание 3-мерных сфероидов из образцов опухолей, полученных от пациентов, и оценка их чувствительности к лекарствам

Похожие видео

0 Просмотры

12:04

Человека нейроэндокринной опухоли клеточных линий в качестве трехмерных моделей по изучению прав нейроэндокринные опухоли терапия

Похожие видео

0 Просмотры

04:29

Иммунофлуоресцентное окрашивание сфероидов: методика анализа сфероидов на экспрессию внутри- и внеклеточных антигенов

Похожие видео

0 Просмотры

03:20

Расщепление сфероидов для субкультивирования и транспортировки: процедура размножения и переноса сфероидов из нейроэндокринной опухоли тонкой кишки

Похожие видео

0 Просмотры

08:50

Продольные морфологических и физиологических мониторинг сфероидов трехмерной опухоли с помощью оптическая когерентная томография

Похожие видео

0 Просмотры

06:27

3D сфероидная модель как более физиологическая система для рака связанных фибробластов дифференциации и вторжения в vitro исследований

Похожие видео

0 Просмотры

09:17

Характеристика влияния миграстатических ингибиторов на 3D-вторжение опухолевых сфероидов с помощью конфокальной микроскопии высокого разрешения

Похожие видео

0 Просмотры

09:43

Создание и характеристика малого кишечника нейроэндокринных опухолевых сфероидов

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 15 августа 2026